RWPE-1人前列腺正常细胞

商品属性：

商品介绍：

细胞别称：RWPE-1；人正常前列腺上皮细胞

种属来源：人

年龄性别：男；54岁

组织来源：前列腺正常细胞

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

背景简介：RWPE-1细胞来源于54岁白人男性。源于正常前列腺周边组织的上皮细胞经过转染HPV-18后建系得到该细胞株。在三维基质胶培养时，在雄作用下，RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基：中分泌PSA（kallikrein 3, KLK3）。来源于RWPE-1的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2细胞株和 RWPE2-W99细胞株。同时，用N-甲醇-N-硝基脲处理RWPE-1，建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株， 分别是 WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11 和 WPE1-NB26 细胞株。 据提供者报道，RWPE-1 细胞株经过检测，乙肝、丙肝、人缺陷病毒都呈阴性。

生物等级：2

细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测：无

基因表达情况：cytokeratin 18, cytokeratin 8; Tumor Supressor Gene(s): p53+, pRB+

保藏机构：ATCC; CRL-11609

培养基：K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ PS

培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

倍增时间：~22 hours

细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3） 细胞冻存: 
收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

注意事项：

1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要后方能丢弃。

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