细胞特性
产品名称
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SW480人结肠腺癌细胞
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英文名称
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SW480:SW480
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分类
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人细胞系
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货号
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XG-X3564
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组织来源
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结直肠癌
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形态
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上皮细胞样
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细胞别称:SW-480; SW 480; SW480E
种属来源:人
年龄性别:男 50岁
组织来源:结直肠癌
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
背景简介:该细胞来源于一个50岁的男性结肠癌患者,SW480 [SW-480]细胞源自原位直肠腺癌,和SW620细胞源自同一病人一年后的结转移。CSAp和直肠抗体3阴性;角蛋白过氧化物酶染色阳性。p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代,309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代。细胞p53蛋白表达水平提高,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性,癌基因N-myc的表达未做检测。SW480 [SW-480]细胞不表达细胞溶解酶,一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。有报道称,SW480 [SW-480]细胞表达GM-CSF。SW480 [SW-480]细胞ras原癌基因的12位密码子有一个突变,可以用作PCR法检测该突变的阳性对照。1978年11月,A·Leibovitz将其提交给ATCC时已传代至第91代。
生物等级:1
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测:无
基因表达情况:carcinoembryonic antigen
(CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days; keratin; transforming growth factor beta,
myc+; myb+ ; ras+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, HLA A2, B8, B17;
Blood Type A; Rh+, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase
staining., The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras,
myb, sis and fos oncogenes.
保藏机构:ATCC; CCL-228 DSMZ; ACC-313
ECACC; 87092801;中国典型培养物保藏中心细胞库
培养基:90%L15+10% FBS+PS
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
倍增时间:~30-50 hours
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
细胞处理
1) 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品:
线粒体苹果酸脱氢酶(MDHm)测试盒
脂质运载蛋白相互作用膜受体蛋白抗体
LMBR1L
组织蛋白酶q抗体
Ctsq
精子卵子结合**碱性螺旋蛋白2抗体 Anti-SOHLH2
磷酸化复制因子A蛋白2抗体 Anti-phospho-RPA32/RPA2(Thr21)
磷酸化IKB α抗体 Anti-Phospho-NFKBIA (Tyr42)
锌指蛋白ZIC5抗体 Anti-ZIC5
E3连接酶MMS21蛋白抗体
NSE2/MMS21
甲型流感病毒血凝素2抗体
H1N1 Hemagglutinin 2
环指蛋白92抗体 Anti-TRIM11/RNF92
前列腺干细胞抗原抗体 Anti-PSCA
蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型4抗体 Anti-PTPN4/MEG1
丝氨酸蛋白酶抑制剂B11抗体 Anti-SERPINB11
SW480人结肠腺癌细胞磷酸化DDX58抗体
phospho-DDX58 (Ser8)
嗅觉受体5H2抗体
OR5H2
细胞核转录因子X盒结合蛋白抗体 Anti-XBP-1
神经*******调控蛋白1抗体 Anti-NPDC1
DNA修复蛋白Rad50抗体 Anti-RAD50
溶质载体蛋白家族35成员C2抗体 Anti-SLC35C2
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)elisa分析检测试剂盒
α1-MG ELISA Kit
人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)elisa分析检测试剂盒
NAGPA蛋白抗体
NAGPA
FLJ39060蛋白抗体
FLJ39060
操作步骤:
步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存
方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。
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