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产品资料

HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞

HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞
  • 产品型号:XG-X3317
  • 产品展商:西格
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞公司正在出售的产品:VA-ES-BJ人上皮样肉瘤细胞 跨膜丝氨酸蛋白酶3抗体 TMPRSS3 小鼠谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCLM)elisa检测试剂盒 10×TBE缓冲液 500ml HumanCCR2ELISAKit
产品描述

细胞特性

产品名称

HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞

英文名称

HCMEC/D3:HCMECD3

分类

人细胞系

货号

XG-X3317

组织来源

脑微血管

形态

纺锤形细胞

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 纺锤形细胞

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO

温度:液氮

培养方案A(默认)

生长培养基:

hCMEC/D3 细胞培养基(CM-0843

培养条件:

气相:空气,95%CO25%, 温度:37

推荐传代比例 1:3-1:6

推荐换液频率 2-3/

参考资料(来源文献)

背景描述 The hCMEC/D3 cell line was derived from human temporal lobe microvessels isolated from tissue excised during surgery for control of epilepsy. The primary isolate was enriched in cerebral endothelial cells (CECs). In the first passage, cells were sequentially immortalized by lentiviral vector transduction with the catalytic subunit of human telomerase (hTERT) and SV40 large T antigen, following which CEC were selectively isolated by limited dilution cloning, and clones were extensively characterized for brain endothelial phenotype. This brain microvascular endothelial cell line represents one such model of the human BBB that can be easily grown and is amenable to cellular and molecular studies on pathological and drug transport mechanisms with relevance to the central nervous system (CNS).

年龄(性别) 女性;

组织来源 脑微血管

细胞类型 转化细胞系

生物等级 BSL-2

保藏机构 KCB; KCB 2019022YJ

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。                      
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

 细胞处理

1) 冻存细胞的复苏

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

公司正在出售的产品:

甲基样蛋白15抗体

METTL15/METT5D1

1号染色体开放阅读框162抗体

C1orf162

跨膜蛋白16C抗体  Anti-TMEM16C/Anoctamin 3

反义导向分子RGMB抗体  Anti-RGMB/Repulsive Guidance Molecule B

谷氨酸受体2D抗体  Anti-NR2D/NMDAR2D

血管内皮生长因子抗体  Anti-VEGF

原肌球蛋白4抗体

TPM4

凋亡相关蛋白激酶样蛋白1抗体

DAPL1

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Sgk3抗体  Anti-SGK3

水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体  Anti-Os05g0477200 protein

视网膜母细胞瘤样蛋白p107抗体  Anti-p107

细胞生长抑制基因1蛋白抗体  Anti-TPP1/CLN2

PE-Cy5标记小鼠IgG(型对照)

HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞Mouse IgG / PE-Cy5

HECTD4蛋白抗体

HECTD4

大鼠核因子κB(NF-κB)elisa分析检测试剂盒

NF-κB ELISA Kit

兔干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa分析检测试剂盒

CXCL10ELISAkit

黑色素瘤分化相关蛋白5抗体

IFIH1

遗传性失明相关蛋白AIPL1抗体

AIPL1

植物花生四烯酸(AA)elisa分析检测试剂盒

AA ELISA kit

人促甲状腺素受体(TSHR)抗体elisa分析检测试剂盒

HumanTSHRantibodyELISA

操作步骤:


步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存

方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。

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