在酶免 疫技术中制备标记物的抗原应纯度高、抗原性完整;制备标记物的抗体应特异性好、效价高、亲和力强、比活性高、能批量生产和易于分离纯化。
制备酶标记物的方法应符合简单、产量高;避免酶、抗体(抗原)、酶标记物各自形成聚合物;标记反应不影响酶的活性和抗原抗体的免 疫反应性等原则。标记物制备的方法基本属于两类:
一、 交联法
交联法是以一可同时与酶和抗体(抗原)结合的 交联剂作为“桥”,分别连接酶与抗体(抗原)的方法,此类方法中目前zui常用的是戊二醛交联法,形成的结合物为:酶-戊二醛-抗体(抗原)
二、直接法
直接法是用一活化剂首先将酶活化,被活化的酶分子上的基团直接可与抗体(抗原)结合形成标记物,如过酸钠法。形成的结合物为:酶-抗体(抗原)。
所有抚生的抗体在室温、37℃保存与-20℃保存具有一样的活性与稳定性。