操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:甘油三酯(TG)测定试剂盒(单试剂GPO-PAP法)
规格:96T
测试方法:比色法
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
锌指蛋白131抗体英文名称:ZNF131 0.2ml
PE-Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy3 0.1ml
胶体金标记的驴抗豚鼠IgGDonkey Anti-Guinea pig IgG/Gold 0.5ml
层粘连蛋白受体1抗体MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 0.5mg
金标记兔抗荧光素 (10nm/15nm)Rabbit Anti-FITC/Gold 0.5ml
小鼠铜蓝蛋白CP/CER(Mouse Ceruloplasmin) ELISA Kit 96T
艾滋病病毒p55抗体英文名称:HIV1 p55 + p17 0.2ml 芳香酶(ARO)ELISA试剂盒 ARO ELISA Kit
人激动异构酶/细胞分裂素MBCKMB(Human cytokinin MB) ELISA Kit 96T
ATP5E蛋白抗体英文名称:ATP5E 0.2ml 隐热蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA试剂盒 NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1 ELISA Kit
立即早期癌基因BRLF1抗体(鼻咽癌基因)英文名称:BRLF1 0.1ml 凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA试剂盒 FⅢ ELISA Kit
杀 肽/天蚕抗 肽单克隆抗体英文名称:Cecropin 1ml 白介素16(IL-16)ELISA试剂盒 IL-16 ELISA Kit
2号染色体开放阅读框44抗体英文名称:C2orf44 0.2ml 60S核糖体蛋白L36a-样(RPL36AL)ELISA试剂盒 RPL36AL ELISA Kit
DYDC1蛋白抗体英文名称:DYDC1 0.2ml 腺苷酸激酶5(AK5)ELISA试剂盒 AK5 ELISA Kit
表皮生长因子抗体英文名称:EGF 0.1ml 乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒 LTF ELISA Kit
胞浆区相关蛋白GIPC2抗体英文名称:GIPC-2 0.2ml 集落刺激因子2受体β(CSF2Rβ)ELISA试剂盒 CSF2Rβ ELISA Kit
抗凝血酶3抗体英文名称:Antithrombin III 0.1ml 热休克蛋白60(HSP60)ELISA试剂盒 HSP60 ELISA Kit
甘油三酯(TG)测定试剂盒(单试剂GPO-PAP法)β-胡萝卜素;纯品型;标准品;有证书 7235-40-7 0.25g 订购|咨询
维生素B5(泛酸钙B5);纯品型;标准品 137-08-6 0.1g 订购|咨询
维生素B12;纯品型;标准品;有证书 68-19-9 50mg 订购|咨询
生物素(维生素H);纯品型;标准品;有证 58-85-5 0.25g 订购|咨询
没食子酸丙酯;纯品型;标准品;有证书 121-79-9 0.25g 订购|咨询
抗坏血酸(维生素C);纯品型;标准品;有 50-81-7 0.25g 订购|咨询
苯甲酸钠;纯品型;标准品;有证书 532-32-1 0.25g 订购|咨询
山梨酸钾;纯品型;标准品;有证书 24634-61-5,590-00-1 0.25g 订购|咨询
反式-甲基异丁香酚;纯品型;标准品;有证 93-16-3 0.5g 订购|咨询
维生素A(醋酸酯);纯品型;标准品;有证 127-47-9 0.1g 订购|咨询
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