操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:Myosin Light Chain 2 (Phospho-Ser18) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
钾离子通道多聚体结构域蛋白12抗体英文名称:KCTD12 0.1ml NAD激酶(NADK)ELISA试剂盒 NADK ELISA Kit
磷酸化磷酯酶Cβ3抗体英文名称:Phospho-PLC beta3 (Ser537) 0.1ml
神经丛蛋白B1抗体英文名称:Plexin B1 0.1ml
内皮细胞纤溶酶原激活抑制蛋白1抗体英文名称:PAI1 0.2ml
共济失调蛋白8抗体英文名称:Twinkle 0.2ml
肌动蛋白(抗原)Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 0.5mg
Alexa Fluor 488标记的兔抗犬IgM抗体Dog IgM/Alexa Fluor 488 0.1ml
Cy7标记的兔抗大鼠IgGRabbit Anti-rat IgG/Cy7 0.1ml
人类疱疹病毒8抗原HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 0.5mg
兔抗人IgG(γ-链)恒定区抗血清Rabbit anti-human IgG heavy chain constant region whole serum 0.5ml
转录调节因子HOXD9抗体英文名称:HOXD9 0.1ml 成纤维细胞生长因子17(FGF17)ELISA试剂盒 FGF17 ELISA Kit
小鼠C肽C-Peptide(Mouse C-Peptide)ELISA Kit 96T
人前列腺素D合成酶PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit 96T
水解酶结构域蛋白14B抗体英文名称:ABHD14B 0.2ml 肿瘤坏死因子受体相关因子1(TRAF1)ELISA试剂盒 TRAF1 ELISA Kit
植物生长 ABP1抗体英文名称:ABP1 1ml 犬尿氨酸(KYN)ELISA试剂盒 KYN ELISA Kit
小脑肽4抗体英文名称:CBLN4 0.2ml CD68分子(CD68)ELISA试剂盒 CD68 ELISA Kit
Myosin Light Chain 2 (Phospho-Ser18) Antibody植物种子活性叶绿体分离试剂盒 进口/国产 规格:20次布美他尼;丁苯氧酸(标准品) Bumetanide 28395-03-1 质量规格:含量测定
植物种子高质纯化叶绿体分离试剂盒 进口/国产 规格:10次氨甲环酸(标准品) Tranexamic acid 1197-18-8 质量规格:>98%,标准品
植物线粒体粗提分离试剂盒 进口/国产 规格:10次氨甲环酸 Tranexamic acid 1197-18-8 质量规格:>98%,BR
植物活性线粒体分离试剂盒 进口/国产 规格:10次丙谷胺(标准品) Proglumide 6620-60-6 质量规格:含量测定
植物高质纯化线粒体分离试剂盒 进口/国产 规格:10次GW501516 GW501516(GSK-516; GW1516) 317318-70-0 质量规格:>98%,高度选择性的PPARβ/δ激动剂
植物组织细胞核粗提分离试剂盒 进口/国产 规格:20次布洛芬(标准品) Ibuprofen 15687-27-1 质量规格:含量测定
植物组织细胞核高纯分离试剂盒 进口/国产 规格:10次比沙可啶(标准品) Bisacodyl 603-50-9 质量规格:含量测定
植物细胞壁钙荧光白(Calcofluor white;CFW)荧光染色试剂盒 进口/国产 规格:20次醋酸氯己定(标准品) Chlorhexidine Acatate 56-95-1 质量规格:含量测定
拟南芥种子甲磺酸乙脂突变诱导试剂盒 进口/国产 规格:5次环戊噻嗪(标准品) Cyclopenthiazide 742-20-1 质量规格:含量测定
植物ATP生物发光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次甲基多巴 L-Methyldopa 41372-08-1 质量规格:>98%,BR
植物染色质沉淀分析(CHIP)试剂盒 进口/国产 规格:10次甲基多巴(标准品) L-Methyldopa 41372-08-1 质量规格:含量测定
植物染色质沉淀分析(CHIP)完全试剂盒(包括抗体) 进口/国产 规格:10次甲芬那酸(标准品) Mefenamic acid 61-68-7 质量规格:含量测定
植物组织可溶性总蛋白制备试剂盒 进口/国产 规格:20次碘化钾(标准品) Potassium iodide 7681-11-0 质量规格:含量测定
植物组织可溶性总核蛋白粗提制备试剂盒 进口/国产 规格:20次硫唑嘌呤(标准品) Azathioprine 446-86-6 质量规格:含量测定
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