操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:IkB-ε (Phospho-Ser22) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
骨涎蛋白抗体英文名称:Bone sialoprotein 0.1ml 鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)ELISA试剂盒 SCCAg ELISA Kit
胶原蛋白和钙结合表皮生长因子结构域1抗体英文名称:CCBE1 0.2ml 蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒 PKC ELISA Kit
人癌胚抗原CEA 0.5mg
信号转导功能磷蛋白DAB2抗体英文名称:DAB2 0.1ml 唾液酸转移酶1(SIAT1)ELISA试剂盒 SIAT1 ELISA Kit
Fas活化的丝/苏氨酸激酶抗体英文名称:FASTK 0.1ml 前庭蛋白1(VEST1)ELISA试剂盒 VEST1 ELISA Kit
谷氨酰胺合成酶/谷氨酸氨连接酶抗体英文名称:Glutamine synthetase 0.1ml 肌钙蛋白I(TNI)ELISA试剂盒 TNI ELISA Kit
丙型肝炎病毒-NS3抗体英文名称:HCV-NS3 0.1ml 促凋亡蛋白1(APOPT1)ELISA试剂盒 APOPT1 ELISA Kit
抑制基因LPP2抗体英文名称:LPP2 0.2ml GATA结合蛋白5(GATA5)ELISA试剂盒 GATA5 ELISA Kit
蛋白激酶锚定蛋白抗体英文名称:Neurobeachin 0.2ml
山核桃素样蛋白1抗体英文名称:Pecanex 0.2ml
RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗体英文名称:RAB40B 0.2ml
胶体金标记的兔抗马IgMRabbit Anti-horse IgM/Gold 0.5ml
锌指蛋白185抗体英文名称:ZNF185 0.2ml
碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗小鼠IgGRabbit Anti-mouse IgG/AP 0.1ml
细胞球蛋白抗原Cygb (cytoglobin) 0.5mg
脑肠肽28Ghrelin 28 0.5mg
IkB-ε (Phospho-Ser22) Antibody通用型马铃薯潜伏性病毒(Red LaSoda Virus;RLaSV/ Potato latent Virus)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次二苯并-30-冠-10-醚(>97.0%(GC)) Dibenzo-30-crown 10-Ether 17455-25-3 质量规格:>97.0%(GC)
通用型小南瓜花叶病毒(Squash Mosaic Virus;SMV)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次4,10-二氮杂-15-冠5-醚(>96.0%(GC)) 4,10-Diaza-15-crown 5-Ether 31249-95-3 质量规格:>96.0%(GC)
通用型**环斑病毒(Tobacco Ringspot Virus;TRSV)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次二苯并-15-冠5-醚(>95.0%(GC)) Dibenzo-15-crown 5-Ether 14262-60-3 质量规格:>95.0%(GC)
通用型番茄斑萎病毒(Tomato Spotted Wilt Virus;TSWV)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次二苯并-21-冠7-醚(>96.0%(GC)) Dibenzo-21-crown 7-Ether 14098-41-0 质量规格:>96.0%(GC)
通用型总番茄斑萎病毒(Total Tospo Virus;TOSPO)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次4'-甲酰苯并-15-冠-5-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-15-crown 5-Ether 60835-73-6 质量规格:>98.0%(GC)
通用型南瓜黄化花叶病毒(Zucchini Yellow Mosaic Virus;ZYMV)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次4'-甲酰苯并-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether 60835-74-7 质量规格:>98.0%(GC)
通用型瓜类性果斑病(西瓜果斑)(Acidovorax avenae subsp. citrulli;Watermelon Fruit Blotch)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次4,7,13,21,24-六氧杂-1,10-二氮杂双环[8,8,8]-二十六烷(>98.0%(GC)(T)) 4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane 23978-09-8 质量规格:>98.0%(GC)(T)
通用型胡萝卜性叶斑病(Xanthomonas campestris pv. Carotae;Xccar)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次2-(羟甲基)-12-冠4-醚(>95.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-12-crown 4-Ether 75507-26-5 质量规格:>95.0%(GC)
通用型野油菜黄单胞(Xanthomonas campestris pv. Pelargonii;Xcp)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次2-(羟甲基)-15-冠5-醚(>96.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-15-crown 5-Ether 75507-25-4 质量规格:>96.0%(GC)
通用型加拿大低酸菜籽油黑胫病/油菜腐烂病/甘蓝黑茎病(Blackleg of Canola/Leptosphaeria maculans/Phoma lingam)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次2-(羟甲基)-18-冠6-醚(>93.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-18-crown 6-Ether 70069-04-4 质量规格:>93.0%(GC)
通用型疫病种(Phytophthora species)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次1,4,8,11-四氮杂环十四烷(>98.0%(T)) 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane 295-37-4 质量规格:>98.0%(T)
通用型丝核种(Rhizoctonia species)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次1,4,7-三氮杂环壬烷三盐酸盐(>98.0%(N)(T)) 1,4,7-Triazacyclononane Trihydrochloride 58966-93-1 质量规格:>98.0%(N)(T)
通用型腐霉属种(Pythium species)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次1,4,8,12-四氮杂环十五烷(>97.0%(T)) 1,4,8,12-Tetraazacyclopentadecane 15439-16-4 质量规格:>97.0%(T)
通用型灰斑病灰梨孢(Grey Leaf Spot Pyricularia grisea)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次1,5,9-三氮杂环十二烷(>90.0%(GC)) 1,5,9-Triazacyclododecane 294-80-4 质量规格:>90.0%(GC)
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