样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:NFκB-p65 (Phospho-Ser529) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
牛血清白蛋白(第五组分)BSA (bovine serum albumin) 5g
小脑肽2抗体英文名称:CBLN2 0.2ml CD6分子(CD6)ELISA试剂盒 CD6 ELISA Kit
膜辅蛋白抗体英���名称:CD46/MCP 0.2ml 血管内皮生长因子165(VEGF165)ELISA试剂盒 VEGF165 ELISA Kit
大肠杆 耐热性肠抗体英文名称:heatstable enterotoxin 1 [Escherichia coli] 0.2ml 肾小球蛋白(GLMN)ELISA试剂盒 GLMN ELISA Kit
G蛋白偶联受体34抗体英文名称:GPR34 0.2ml 接触蛋白关联蛋白样蛋白4(CNTNAP4)ELISA试剂盒 CNTNAP4 ELISA Kit
HERPUD蛋白家族成员2抗体英文名称:HERPUD2 0.2ml 蛋白酪氨酸磷酸酶ⅣA3(PTPⅣA3)ELISA试剂盒 PTPⅣA3 ELISA Kit
胰岛素抗体英文名称:Insulin 0.1ml REST辅抑制因子1(RCOR1)ELISA试剂盒 RCOR1 ELISA Kit
线粒体蛋白18抗体英文名称:MTP18 0.2ml
尾部结构蛋白抗体英文名称:Cenexin1 0.1ml
转录辅助因子退变样蛋白2抗体英文名称:VGLL2 0.2ml
细胞生长抑制基因1蛋白抗体英文名称:TPP1 0.2ml
维生素A抗体英文名称:Vitamin A 0.1ml
兔抗豚鼠IgG抗血清Rabbit anti-Guinea pig IgG whole serum 1ml
FITC标记的兔抗猴IgGRabbit Anti-Monkey IgG/FITC 0.3ml
表皮生长因子受体3抗体英文名称:ErbB 3 0.1ml 四旋蛋白5(TSPAN5)ELISA试剂盒 TSPAN5 ELISA Kit
大鼠分泌型IgA(抗原)sIgA 1mg
NFκB-p65 (Phospho-Ser529) Antibody荧光定量分析 进口/国产 规格:20样本10,12-二十五碳二炔-1-醇(>98.0%(GC)) 10,12-Pentacosadiyn-1-ol 92266-90-5 质量规格:>98.0%(GC)
紫外可见光分析 进口/国产 规格:20样本1-碘代戊炔(>97.0%(GC)) 1-Pentynyl Iodide 14752-61-5 质量规格:>97.0%(GC)
化学发光分析 进口/国产 规格:20样本1-碘代-1-丙炔(>97.0%(GC)) 1-Iodo-1-propyne 624-66-8 质量规格:>97.0%(GC)
质谱分析 进口/国产 规格:20样本1-(**基硅基)-1-丙炔(>98.0%(GC)) 1-(Trimethylsilyl)-1-propyne 6224-91-5 质量规格:>98.0%(GC)
荧光定量PCR分析 进口/国产 规格:20样本22-二十三碳烯酸(>95.0%(GC)(T)) 22-Tricosenoic Acid 65119-95-1 质量规格:>95.0%(GC)(T)
病毒包装 进口/国产 规格:20样本10-十一碳炔酸(>95.0%(T)) 10-Undecynoic Acid 2777-65-3 质量规格:>95.0%(T)
薄层色谱分析 进口/国产 规格:20样本10-十一炔-1-醇(>95.0%(GC)) 10-Undecyn-1-ol 2774-84-7 质量规格:>95.0%(GC)
基因甲基化分析 进口/国产 规格:20样本亚甲基二水杨酸(异构体的混合物)(>90.0%(T)) Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers) 27496-82-8 质量规格:>90.0%(T)
共沉淀分析 进口/国产 规格:20样本2-氨基-2',5-二氯二苯甲酮(>98.0%(N)) 2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone 2958-36-3 质量规格:>98.0%(N)
染色质共沉淀分析(CHIP) 进口/国产 规格:20样本4-烯丙氧基-2-羟基二苯甲酮(>97.0%(HPLC)(T)) 4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone 2549-87-3 质量规格:>97.0%(HPLC)(T)
ELISA分析 进口/国产 规格:20样本3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T)) 3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride 2421-28-5 质量规格:>96.0%(T)
酶学分析 进口/国产 规格:20样本4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚(>98.0%(GC)) 4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide 83846-85-9 质量规格:>98.0%(GC)
组化染色操作 进口/国产 规格:20样本4,4'-双(甲氨基)二苯甲酮(>98.0%(T)) 4,4'-Bis(methylamino)benzophenone 3708-39-2 质量规格:>98.0%(T)
细胞基因敲除或插入 进口/国产 规格:20样本2,4'-二氯二苯甲酮(>99.0%(GC)) 2,4'-Dichlorobenzophenone 85-29-0 质量规格:>99.0%(GC)
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