mTOR (Phospho-Ser2448) Antibody

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：mTOR (Phospho-Ser2448) Antibody
规格：详见说明
测试方法：详见说明
客户自备仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点：
       1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
       2、灵敏度高，操作便捷
       3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
1号染色体开放阅读框163抗体英文名称：C1orf163 0.2ml  γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)ELISA试剂盒  γ-GCS ELISA Kit

6号染色体开放阅读框222抗体英文名称：C6orf222 0.2ml  原肌球蛋白4(TPM4)ELISA试剂盒  TPM4 ELISA Kit

真核翻译起始因子5抗体英文名称：EIF5 0.2ml  肽酶抑制因子15(PI15)ELISA试剂盒  PI15 ELISA Kit

丝束蛋白T Plastin抗体英文名称：PLASTIN3 0.2ml  

生长停滞特异性蛋白2家族1抗体英文名称：GAS2L1 0.2ml  高尔基体蛋白A6(GOLGA6)ELISA试剂盒  GOLGA6 ELISA Kit

白介素6抗体英文名称：IL-6 0.1ml  胺甲基四氢叶酸环化脱氢酶(FTCD)ELISA试剂盒  FTCD ELISA Kit

  色素瘤相关抗原11抗体英文名称：MAGEA11 0.2ml  70kDa热休克蛋白结合蛋白1(HSPBP1)ELISA试剂盒  HSPBP1 ELISA Kit

染色体特异性转录延伸因子抗体英文名称：SUPT16H 0.2ml  

丝氨酸蛋白酶8抗体英文名称：PRSS8 0.1ml  

磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体英文名称：Phospho-RSK2 (Ser227) 0.1ml  

跨膜转运蛋白21抗体英文名称：TMP21 0.1ml  

性  结合球蛋白抗体英文名称：SHBG 0.1ml  

钙蛋白酶1抗体英文名称：Calpain 1 0.1ml  延长蛋白3(ELP3)ELISA试剂盒  ELP3 ELISA Kit

B细胞特异性转录因子抗原BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) 0.5mg  

基质金属蛋白酶-1（小鼠抗原）MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1) 0.5mg  

兔血纤蛋白原Fbg (Rabbit Fibrinogen) ELISA Kit 96T  

mTOR (Phospho-Ser2448) Antibody印迹或沉淀裂解液 进口/国产 规格：用于WESTERN或IP四溴双酚A双(2-羟乙基)醚(>93.0%(GC)) Tetrabromobisphenol A Bis(2-hydroxyethyl) Ether 4162-45-2 质量规格：>93.0%(GC)

变性裂解液 进口/国产 规格： 含有SDS4,4'-(六氟异亚丙基)二酞酸酐(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride 1107-00-2 质量规格：>98.0%(GC)(T)

 进口/国产 规格：3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T)) 3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride 2421-28-5 质量规格：>96.0%(T)

RIPA基础裂解液 进口/国产 规格： 不含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂三环[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC)) Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride 738-90-9 质量规格：>98.0%(GC)

RIPA完全裂解液 进口/国产 规格：含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂ε-己内酯(>99.0%(GC)) ε-Caprolactone 502-44-3 质量规格：>99.0%(GC)

通用型非变性裂解液 进口/国产 规格：适合各种细胞native蛋白β-丙内酯(>95.0%(GC)(T)) β-Propiolactone 57-57-8 质量规格：>95.0%(GC)(T)

10X通用型非变性裂解液 进口/国产 规格：适合各种细胞native蛋白DL-丙交酯(>98.0%(T)) DL-Lactide 95-96-5 质量规格：>98.0%(T)

无去垢剂裂解液 进口/国产 规格：用于物理裂解L-(-)-交酯(>98.0%(T)) L-(-)-Lactide 4511-42-6 质量规格：>98.0%(T)

动物样品二维电泳裂解液 进口/国产 规格：用于动物/人体细胞或组织蛋白二维电泳δ-戊内酯(>98.0%(GC)) δ-Valerolactone 542-28-9 质量规格：>98.0%(GC)

样品二维电泳裂解液 进口/国产 规格：用于蛋白二维电泳1,3-双(六氟-α-羟基异丙基)苯(>98.0%(GC)) 1,3-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene 802-93-7 质量规格：>98.0%(GC)

酵母样品二维电泳裂解液 进口/国产 规格：用于酵母蛋白二维电泳1,4-双(六氟-α-羟基异丙基)苯水合物(>97.0%(GC)) 1,4-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene Hydrate 1992-15-0 质量规格：>97.0%(GC)

印迹或沉淀裂解液 进口/国产 规格：用于WESTERN或IP1,10-双[(4-乙氧羰基)苯氧基]癸烷 1,10-Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenoxy]decane 103330-20-7 质量规格：

变性裂解液 进口/国产 规格： 含有SDS1,4-苯二硫醇(>98.0%(GC)) 1,4-Benzenedithiol 624-39-5 质量规格：>98.0%(GC)

BLOTTO-10核酸杂交封闭溶液 进口/国产 规格：100毫升1,3-双[2-(4-羟苯基)-2-丙基]苯(>98.0%(GC)) 1,3-Bis[2-(4-hydroxyphenyl)-2-propyl]benzene 13595-25-0 质量规格：>98.0%(GC)

操作步骤(仅供参考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：  
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

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