操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:IGF-1R (Phospho-Tyr1280) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
类固醇5α还原酶1抗体(5α-Reductase 1)英文名称:SRD5A1 0.1ml
PE-CY5标记的小鼠抗人IgMMouse Anti-human IgM/PE-CY5 0.1ml
胰岛素样生长因子结合蛋白-5(抗原)IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5) 0.5mg
酪氨酸单氧化酶微管相关蛋白MICAL抗体英文名称:MICAL1 0.1ml
多功能DNA修复酶抗体英文名称:APE1 0.1ml 三角形四肽重复蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA试剂盒 TTC1/TPR1 ELISA Kit
19号染色体开放阅读框48抗体英文名称:C19orf48 0.1ml 骨形成蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒 BMP4 ELISA Kit
磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体英文名称:phospho-CHEK1 (Ser345) 0.1ml L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒 PAL ELISA Kit
磷酸化原癌蛋白CBL2抗体英文名称:phospho-CBL2 (Tyr731) 0.1ml 血小板衍生生长因子AB(PDGFAB)ELISA试剂盒 PDGFAB ELISA Kit
细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体英文名称:NFkB p105 / p50 0.1ml
蛋白酶体PSMα2抗体英文名称:Proteasome 20S alpha 2 0.2ml
RAS家族关联结构域蛋白6抗体英文名称:RASSF6 0.2ml
蛋白p53诱导蛋白8英文名称:TP53I8 0.1ml
叉头蛋白3-T细胞转录因子(多肽抗原)FoxP3 0.5mg
人刚地弓形虫T.gondii(Human Toxoplasma Gondii ELISA Kit 96T
人状瘤病毒抗体IgMHPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 96T
人重组激活基因1Human recombination activating gene 1,RAG-1 ELISA Kit 96T
IGF-1R (Phospho-Tyr1280) Antibody阿莫曲普坦-d6 Almotriptan-d6 154323-57-6 (unlabeled) 质量规格:美国进口
阿莫曲普坦盐酸盐 Almotriptan Hydrochloride 154323-46-3 质量规格:美国进口
阿莫曲普坦 N-氧化物 Almotriptan N-Oxide 603137-43-5 质量规格:美国进口
阿糖腺苷一水物 Vidarabine Monohydrate 24356-66-9 质量规格:美国进口
盐酸倍他司汀-d3 Betahistine-d3 Dihydrochloride 244094-72-2 质量规格:美国进口
倍他司汀一盐酸盐 Betahistine Hydrochloride 15430-48-5 质量规格:美国进口
倍他司汀-d3 β-Histine-d3 244094-70-0 质量规格:美国进口
比索洛尔 Bisoprolol 66722-44-9 质量规格:美国进口
去异丙氧基比索洛尔 Des(isopropoxyethyl) Bisoprolol 62572-93-4 质量规格:美国进口
4-(2-Hydroxy-3-isopropylaminopropoxy)benzoic Acid (Bisoprolol Metabolite) 4-(2-Hydroxy-3-isopropylaminopropoxy)benzoic Acid (Bisoprolol Metabolite) 72570-70-8 质量规格:美国进口
N-去丁基布比卡因 N-Desbutyl Bupivacaine 15883-20-2 质量规格:美国进口
布替萘芬 Butenafine 101828-21-1 质量规格:美国进口
卡托普利二硫化物 Captopril Disulfide 64806-05-9 质量规格:美国进口
氯地孕酮 Chlormadinone 1961-77-9 质量规格:美国进口
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