Smad3 (Phospho-Ser425) Antibody

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：Smad3 (Phospho-Ser425) Antibody
规格：详见说明
测试方法：详见说明
客户自备仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点：
       1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
       2、灵敏度高，操作便捷
       3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。

操作步骤(仅供参考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：  
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
磷酸化细胞核受体Rev-Erbα抗体英文名称：Phospho-NR1D1(Ser55 + Ser59) 0.1ml  

富含GC启动子结合蛋白1/血管壁相连蛋白抗体英文名称：GPBP1 0.2ml  核糖核酸酶K(RNASEK)ELISA试剂盒  RNASEK ELISA Kit

转录因子HES2抗体英文名称：HES2 0.2ml  补体成分1r(C1r)ELISA试剂盒  C1r ELISA Kit

自噬微管相关蛋白轻链3抗体英文名称：LC3B/MAP LC3β/MAP1A 0.1ml  CopineⅨ蛋白(CPNE9)ELISA试剂盒  CPNE9 ELISA Kit

谷氨酸受体2D抗体英文名称：NR2D 0.1ml  

尿激酶型纤溶酶原激活因子受体抗体英文名称：uPA Receptor 0.1ml  

DNA修复和重组蛋白RAD54B抗体英文名称：RAD54B 0.2ml  

三碘甲狀腺素T3抗体英文名称：T3 0.1ml  

丝氨酸/苏氨酸激酶36融合同源蛋白抗体英文名称：STK36 0.2ml  

磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗体英文名称：phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 0.1ml  白介素23(IL23)ELISA试剂盒  IL23 ELISA Kit

基质金属蛋白酶9MMP9 0.5mg  

磷酸钠协同转运蛋白抗原SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 0.5mg  

人正常T细胞表达和分泌因子RANTES/CCL5(Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA kit 96T  

人肿瘤特异性移植抗原TSTA(Human tumor specific transplantation antigen) ELISA Kit 96T  

人  素瘤衍生亮氨酸拉链额外核因子MLZE(Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor) ELISA Kit 96T  

Smad3 (Phospho-Ser425) Antibody

D,L-福莫特罗-D6 (主要的) D,L-Formoterol-D6 (Major) 73573-87-2 (unlabeled) 质量规格：美国进口

盐酸苄基肼 Benzylhydrazine hydrochloride 1073-62-7 质量规格：美国进口

苄基肼 Benzylhydrazine 555-96-4 质量规格：美国进口

草酸盐苄基肼 Benzylhydrazine oxalate salt 32064-65-6 质量规格：美国进口

N-去甲酰-N-苄氧羰基奥利司他 N-Deformyl-N-benzyloxycarbonyl Orlistat 108051-94-1 质量规格：美国进口

(2S,3R,5S)-5-[(N-甲酰-L-亮氨酰)氧]-2-己基-3-羟基十六烷酸(奥利司他杂质) (2S,3R,5S)-5-[(N-Formyl-L-leucyl)oxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecanoic Acid (Orlistat Impurity) 130793-28-1 质量规格：美国进口

C17鞘氨醇 C17 Sphingosine 6918-48-5 质量规格：美国进口

D-赤-鞘氨醇 C-15 D-erythro-Sphingosine C-15 86555-28-4 质量规格：美国进口

N-十八烷酰二氢-D-赤-鞘氨醇 N-Stearoyldihydro-D-erythro-Sphingosine 2304-80-5 质量规格：美国进口

Fmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇 Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine 676485-58-8 质量规格：美国进口

D-赤-鞘氨醇(硫酸) D-erythro-Sphingosine (sulfate) 56607-20-6 质量规格：美国进口

D-赤-鞘氨醇-1-磷酸盐 D-erythro-Sphingosine-1-phosphate 26993-30-6 质量规格：美国进口

N-十八烷酰-D-鞘氨醇 N-Stearoyl-D-Sphingosine 2304-81-6 质量规格：美国进口

二氢-D-赤-鞘氨醇 Dihydro-D-erythro-Sphingosine 764-22-7 质量规格：美国进口

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