Akt (Ab-473) Antibody

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：Akt (Ab-473) Antibody
规格：详见说明
测试方法：详见说明
客户自备仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点：
       1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
       2、灵敏度高，操作便捷
       3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。

操作步骤(仅供参考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：  
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
罗丹明标记的小鼠抗人IgMMouse Anti-human IgM/RBITC 0.1ml  

FITC标记的兔抗大鼠IgGRabbit Anti-rat IgG/FITC 0.3ml  

VSV-G tag标签抗���VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) 0.5mg  

9号染色体开放阅读框79抗体英文名称：C9orf79  0.2ml  人抗着丝点抗体(ACA)ELISA试剂盒  ACA ELISA Kit

CD26抗体英文名称：CD26/DPP4 0.1ml  钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒  CR ELISA Kit

3号染色体开放阅读框54抗体英文名称：C3orf54 0.2ml  补体片段3d(C3d)ELISA试剂盒  C3d ELISA Kit

中心体蛋白CEP128抗体英文名称：CEP164 0.1ml  肿瘤坏死因子配体超家族成员7(TNFSF7)ELISA试剂盒  TNFSF7 ELISA Kit

DNA酶1样蛋白1抗体英文名称：DNASE1L1 0.2m  拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)ELISA试剂盒  TOP1 ELISA Kit

4号染色体开放阅读框21抗体英文名称：C4orf21 0.2ml  钙联蛋白(CNX)ELISA试剂盒  CNX ELISA Kit

受磷蛋白/心脏磷蛋白抗体英文名称：phospholamban 0.1ml  

丝氨酸羧肽酶1抗体英文名称：Serine carboxypeptidase 1 0.2ml  

血管活性肠肽受体-1抗体英文名称：VIP Receptor 1 0.1ml  

PE标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE 0.1ml  

大鼠基质细胞衍生因子1βSDF-1 Beta/CXCL12 ELISA Kit 96T  

人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1EAR1(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1) ELISA KIT 96T  

膜粘连蛋白5抗体英文名称：Annexin V 0.1ml  血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)ELISA试剂盒  ANG ELISA Kit

Akt (Ab-473) Antibody支原体培养基基础    250用于培养支原体的基础培养基 粗壮假丝酵母 冻干粉

产气荚膜菌琼脂基础 (OPSP) (CM0543)    Oxoid　 拟热带假丝酵母 冻干粉

乳糖（**用） Lactose Bacteriological    Oxoid500g 马其顿假丝酵母 冻干粉

甘露醇盐琼脂    金黄色葡萄球菌的选择性分离培养500g 解脂假丝酵母 冻干粉

Test test PH7.2 for the inhibitor test测试琼脂PH7.2（抑制剂测试）    1.15787.0500MERCK默克 郎比可假丝酵母 冻干粉

Reinforced clostridial medium(RCM)梭状芽孢杆菌加强培养基    1.05411.0500MERCK默克 克鲁斯假丝酵母 冻干粉

尿道定位显色培养基B    25000 mL/瓶 绿色链霉菌 冻干粉

TCBS琼脂    250(g) 紫色链霉菌 冻干粉

乳酸杆菌肉汤培养基    250(g) 串珠镰孢 冻干粉

HE琼脂（HE）    1000(g) 委内瑞拉链霉菌 冻干粉

卡那霉素七叶甙叠氮琼脂基础(CM0591)    Oxoid　 地生翅孢壳 冻干粉

麦芽汁琼脂 (CM0247)    Oxoid　 奇异翅孢壳 冻干粉

卵黄亚碲酸盐增菌液    与Baird-Parker琼脂基础合用，用于金黄色葡萄球菌选择性培养100ML*6 束状刺盘孢 冻干粉

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