操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:PKR (Ab-451) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T)) Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid 869-52-3 质量规格:>98.0%(T) 食物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
TAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T)) TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol] 1147-56-4 质量规格:>99.0%(T) 体液总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
二甲基偶氮磺III Dimethylsulfonazo III 14979-11-4 质量规格:碱性稀土金属用的分光光度试剂及硫酸根用钡的沉淀滴定指示剂 总抗氧化能力(TAC)终点比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
偶氮磺III(>90.0%(HPLC)) Sulfonazo III 68504-35-8 质量规格:>90.0%(HPLC) 细胞超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
2-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸三钠盐水合物(>95.0%(HPLC)) 3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate 23647-14-5 质量规格:>95.0%(HPLC) 组织超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
2,2'-二羟基偶氮苯(>98.0%(T)) 2,2'-Dihydroxyazobenzene 2050-14-8 质量规格:>98.0%(T) 血液超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
芪偶氮 Stilbazo 1571-36-4 质量规格:铝和其他金属等用分光光度试剂 体液超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
荧光镓试剂(>98.0%(T)) Lumogallion 4386-25-8 质量规格:>98.0%(T) 超氧阴离子自由基终点比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50/100次
浴酮灵二磺酸二钠盐 Disodium Bathocuproinedisulfonate 52698-84-7 质量规格:用于血液中铜的测定 细胞(NO)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
水合红菲绕啉二磺酸钠水合物 Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate 53744-42-6 质量规格:用于亚铁离子的测定 组织(NO)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
浴铜灵 (升华提纯)(>99.0%(HPLC)(T)) Bathocuproine (purified by sublimation) 4733-39-5 质量规格:>99.0%(HPLC)(T) (NO)终点比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:100次
红菲绕啉(升华提纯)(>99.0%(HPLC)(T)) Bathophenanthroline (purified by sublimation) 1662-01-7 质量规格:>99.0%(HPLC)(T) 动物组织羟脯氨酸(HYP)比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
浴铜灵(>98.0%(T)) Bathocuproine 4733-39-5 质量规格:>98.0%(T) 体液羟脯氨酸(HYP)比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
新亚铜试剂半水合物(>98.0%(T)) Neocuproine Hemihydrate 484-11-7 质量规格:>98.0%(T) 羟脯氨酸(HYP)高效液相色谱定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
PKR (Ab-451) Antibody大鼠γ干扰素(IFNγ)ELISA试剂盒 英文名: IFNγ ELISA Kit
小鼠高迁移率族蛋白1(HMGB1)ELISA试剂盒 英文名: HMGB1 ELISA Kit
小鼠70kDa热休克蛋白5(HSPA5)ELISA试剂盒 英文名: HSPA5 ELISA Kit
大鼠甲状旁腺素受体2(PTHR2)ELISA试剂盒 英文名: PTHR2 ELISA Kit
小鼠中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒 英文名: NAP3 ELISA Kit
大鼠胶原C末端肽(CTX)ELISA试剂盒 英文名: CTX ELISA Kit
小鼠乙酰胆碱转移酶(CHAT)ELISA试剂盒 英文名: CHAT ELISA Kit
小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒 英文名: HBsAg ELISA Kit
大鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)ELISA试剂盒 英文名: IGF1R ELISA Kit
小鼠半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)ELISA试剂盒 英文名: caspase-3 ELISA Kit
大鼠细胞分裂周期基因(CDC)ELISA试剂盒 英文名: CDC ELISA Kit
大鼠白介素8受体β(IL8Rβ)ELISA试剂盒 英文名: IL8Rβ ELISA Kit
小鼠色胺酸羟化酶1(TPH1)ELISA试剂盒 英文名: TPH1 ELISA Kit
大鼠别孕烯醇酮/3α,5α-四氢孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA试剂盒 英文名: AP/3α,5α-THP ELISA Kit
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