操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:Smad3 (Ab-425) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
盐酸罗匹尼罗 Ropinirole HCl 91374-20-8 质量规格:>98.0% 水蛭素(hirudin)活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
盐酸罗哌卡因 Ropivacaine hydrochloride 132112-35-7 质量规格:>99%,BR,一水合物 凝血酶时间(TT)检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
盐酸罗哌卡因(标准品) Ropivacaine hydrochloride 132112-35-7 质量规格:>99%,标准品 凝血酶原时间(PT)检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
瑞舒伐他汀钙/罗苏伐他汀钙 Rosuvastatin Calcium 147098-20-2 质量规格:>99%,BR 优球蛋白溶解时间(ELT)检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
瑞舒伐他汀钙/罗苏伐他汀钙(标准品) Rosuvastatin Calcium 147098-20-2 质量规格:HPLC>98%,标准品 活化部分凝血活酶时间(APTT)凝固法检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
磷酸西他列汀一水 Sitagliptin phosphate monohydrate 654671-77-9 质量规格:≥98.5%,BR,可用于细胞培养 活化部分凝血活酶时间(APTT)比色法检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
磷酸西他列汀一水(标准品) Sitagliptin phosphate monohydrate 654671-77-9 质量规格:HPLC>98%,标准品 纤维蛋白原凝结时间(FIB)Clauss法检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
壮观霉素,盐酸大观霉素 Spectinomycin Hydrochloride 22189-32-8 质量规格:>95%,BR 酰胺水解活力(AMINOLYTIC)检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
壮观霉素(标准品) Spectinomycin Hydrochloride 22189-32-8 质量规格:含量测定 纤维素分解活力(FIBRINOLYTIC)检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
盐酸坦洛新/盐酸坦索罗辛 Tamsulosin hydrochloride 106463-17-6 质量规格:>98.5%,EP6.5 血栓溶解活力(THROMBOLYTIC)体外检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
红霉酮(特利霉素) Telithromycin 191114-48-4 质量规格:>95% D-二聚体浊度法检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
替米沙坦 Telmisartan 144701-48-4 质量规格:>99%,可用于细胞培养 D-二聚体乳胶凝集(latex agglutination)法检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
替米沙坦(标准品) Telmisartan 144701-48-4 质量规格:HPLC>98%,标准品 D-二聚体ELISA检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
异烟肼 Isoniazid 54-85-3 质量规格:>99%,BR 细胞组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
Smad3 (Ab-425) Antibody小鼠单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA试剂盒 英文名: MCP-2/CCL8 ELISA Kit
大鼠神经调节蛋白1(NRG1)ELISA试剂盒 英文名: NRG1 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子7(FGF7)ELISA试剂盒 英文名: FGF7 ELISA Kit
小鼠四旋蛋白30(TSPAN30)ELISA试剂盒 英文名: TSPAN30 ELISA Kit
大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA试剂盒 英文名: MCP-1 ELISA Kit
小鼠热休克因子1(HSF1)ELISA试剂盒 英文名: HSF1 ELISA Kit
小鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒 英文名: TLR4 ELISA Kit
大鼠鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶2(SGPP2)ELISA试剂盒 英文名: SGPP2 ELISA Kit
小鼠血小板内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)ELISA试剂盒 英文名: PECAM-1/CD31 ELISA Kit
大鼠末端补体复合物C5b-9(C5b-9)ELISA试剂盒 英文名: C5b-9 ELISA Kit
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 英文名: SOD ELISA Kit
小鼠肌肉生长抑制素(MSTN)ELISA试剂盒 英文名: MSTN ELISA Kit
大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒 英文名: 17-OHP ELISA Kit
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 英文名: BMP-2 ELISA Kit
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