操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:PRL-3 Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
柠檬酸铁(>98%,BR) Iron(III) citrate 3522-50-7 质量规格:>98%,BR 冰冻切片组织CYP1A2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
DL-乳酸(85~90%,BR) DL-Lactic acid 50-21-5 质量规格:85~90%,BR 石蜡切片组织CYP1A2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
DL-乳酸(USP) DL-Lactic acid 50-21-5 质量规格:88~92%,USP 载玻片细胞CYP1A2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
柠檬酸三铵 Ammonium citrate, tribasic 3458-72-8 质量规格:> 98%,AR 冰冻切片组织CYP1A2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
铬天青S(Ind Grade) CAS, Chrome azurol S 1667-99-8 质量规格:Ind Grade 石蜡切片组织CYP1A2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
5'-三磷酸胞苷二钠盐 Cytidine-5'-triphosphate (CTP), disodium salt 652154-13-7 质量规格:>98%,分子生物学级 细胞CYP1A2蛋白表达比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:10/50 次
纤维素酶(酶活>45 U/mg) Cellulase 9012-54-8 质量规格:酶活>45 U/mg,BC 细胞CYP1A2蛋白表达荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:10/50 次
派洛宁Y(Ind Grade) Pyronin Y 92-32-0 质量规格:Ind Grade CYP1A2蛋白表达西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格:5次
鱼精蛋白硫酸盐来源于鲑鱼 Protamine sulfate from Salmom 53597-25-4 质量规格:Grade II,sigma分装 CYP1A2蛋白共沉淀分析试剂盒 进口/国产 规格:5次
5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐钠盐(分子生物学级) BCIP, disodium salt 102185-33-1 质量规格:分子生物学级 CYP1A2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 进口/国产 规格:25次
乙酸铜水合物(>99%,BR) Copper(II) acetate, hydrate 6046-93-1 质量规格:>99%,BR 细胞CYP2B1蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
磷酸肌酸钠盐四水 Creatine phosphate 922-32-7 质量规格:>98%,BR 载玻片细胞CYP2B1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
1,6-二磷酸果糖三钠盐(98-101.0%,BR) Fructose 1,6-bisphosphate, 3sodium salt 81028-91-3 质量规格:98-101.0%,BR 冰冻切片组织CYP2B1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次
1,6-二磷酸果糖三钠盐(98-101.0%,BR) Fructose 1,6-bisphosphate,3sodium salt 81028-91-3 质量规格:98-101.0%,BR 石蜡切片组织CYP2B1蛋白表达PRL-3 Antibody小鼠磷酸烯醇式酸羧激酶1(PCK1)ELISA试剂盒 英文名: PCK1 ELISA Kit
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒 英文名: NAG ELISA Kit
小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒 英文名: CT ELISA Kit
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒 英文名: TRAIL-R4 ELISA Kit
大鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)ELISA试剂盒 英文名: IκBα ELISA Kit
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒 英文名: IGFBP2 ELISA Kit
大鼠黄体**素(LH)ELISA试剂盒 英文名: LH ELISA Kit
小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒 英文名: HO-2 ELISA Kit
小鼠蛋白Z(PROZ)ELISA试剂盒 英文名: PROZ ELISA Kit
大鼠球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 英文名: IgA ELISA Kit
小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒 英文名: Orexin A ELISA Kit
大鼠羧甲基赖氨酸(CML)ELISA试剂盒 英文名: CML ELISA Kit
大鼠3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)ELISA试剂盒 英文名: HMGCR ELISA Kit
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒 英文名: INH-A ELISA Kit
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