操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,自主**,技术**团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择。
产品名称
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测定方法
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规格
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货号
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辅酶ⅡNADP(H)含量生化试剂盒50管/24样
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可见分光光度法
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50管/24样
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BJ-0161115-50管/24样
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商品介绍:
测定意义
辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP+为NADPH,从而检测NADP+含量。
所需的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
MK2-IN-1 hydrochloride MAPKAPK2(MK2)激酶抑制剂 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
BCIP/NBT Alkaline Phosphatase (AP) Substrate Kit For IHC BCIP/NBT显色试剂盒蓝紫色(IHC) 1kit
Poloxime Poloxime 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|500mg|1g
Rebaudioside A α-glucosidase抑制剂(Rebaudioside A) 1mL(10mM)|100mg|500mg
Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素盐酸盐 25mg
BMS-983970 Notch抑制剂(BMS-983970) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
TAPI-2 MMP/TACE和ADAM抑制剂(TAPI-2) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
AS 602801 JNK抑制剂(AS 602801) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
甲酸脱钙液 500ml
Dapagliflozin ((2S)-1,2-propanediol, hydrate) SGLT2抑制剂(BMS-512148) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Troglitazone PPARγ激动剂 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
Streptavidin Alkaline Phosphatase Immunohistochemistry Kit (Mouse) SAP法**组织化学试剂盒(小鼠) 100次|500次|1000次
硼酸-硼砂缓冲液(pH7.4-9.0) 500ml
L-Tyrosine 柠檬酸合成酶抑制剂(L-Tyrosine) 1mL(10mM)|200mg|500mg
辅酶ⅡNADP(H)含量生化试剂盒50管/24样人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Lane Marker Loading Buffer(5x)/���白示踪上样缓冲液(非还原,5x)5ml5mlgersion
人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 KB/鼻咽癌细胞株国产gersion
人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 K562全细胞裂解液100μg100μggersion
兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 K562/慢性髓性白血病细胞株国产gersion
小鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Jurkat全细胞裂解液100μg国产gersion
猪载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Jurkat/人外周血白血病T细胞株国产gersion
大鼠维生素D3(VD3)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Inclusion body Denature Reagent/包涵体蛋白溶解液100ml国产gersion
人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Improved-Lowry蛋白定量试剂盒500次国产gersion
人碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Improved-Hematoxylin/改良型苏木素(IHC常用复染试剂)10ml国产gersion
小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 HT-29全细胞裂解液100ug100uggersion
人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 IEC-6/大鼠小肠上皮细胞株国产gersion
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