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如何长期维持细胞株?
细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经**传代成功后即为细胞系(cell line), 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。 所以细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。从培养代数来讲,可培养到40-50代。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。对于人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
给养 (给予新鲜的培养基) ,细胞生长过程中会消耗培养基中的某些必需因子,必须更换培养基。
分瓶 (传代、细胞数批减少),细胞数量不断增长,超出容器和培养基的负荷。(PS: 培养和传代是同时进行的,很难只进行一个而不进行另一个操作。)
冻存 细胞株都必须分装冻存样品。可以作为备用,防止细胞表型的漂变或是污染。
时刻观察你的细胞,不要在没有进行倒置显微镜观察的情况下就进行细胞传代、细胞实验或冻存细胞。通过连续的观察,你可以在污染没有成为主要危害前发现它,还能在细胞形态发生变化时知道漂变的产生,还可以决定什么时侯传代、什么时候进行实验以及什么时候放弃实验。
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