冻干多肽的溶解: 1、溶解多肽原则是使用无菌蒸馏水或去离子水,应溶解在无菌的蒸馏水中或用0.45或0.2孔径的滤膜过滤除 菌。含有Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化,应溶于无氧的水中,无氧水可通过注入惰性气体(氮、氦、氩)减压除气得到; 2、若多肽不溶于纯水,超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度。 3、若多肽含有多个碱性氨基酸,使用(1-10%)的乙酸水溶液:对于疏水性强的多肽,应使用50%的乙酸; 4、若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用氨溶液(1-10%)或重碳酸盐等挥发性的碱性缓冲液溶解。 5、异丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱,有机溶剂的量必须很少否则将严重影响停留时间; 6、若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳香链而高度疏水、或为中性肽时,DMF或DMSO等膜变性剂的使用,有利于多肽的溶解: a.高浓度模变性剂通过破坏多肽的二级结构而助溶; b.膜变性剂适于多肽分析液的制备,但可能会对其生物活性的研究工作造成干扰; c.DMF是变性剂(浓度可达30%),滴加至多肽溶解; d.反相层析法时,DMF将与洗脱液前锋一起流出,根据入量的多少,峰值可能很高。大多数肽能在大量DMF流出后几分钟内流出,若肽链很小,洗脱太早,多肽的量将很低。