完整的ELISA试剂盒包括:
①酶的底物;
②已包被抗原或抗体的固相载体(免yi 吸附剂);
③酶标记的抗原或抗体(结合物);
④结合物及标本的稀释液;
⑤洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
⑥阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参阅规范品和操控血清(定量测定中);
⑦酶反响终止液,常用的HRP反响终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的*终体积而异,在板式ELISA中一般选用2mol/L。
为其保存后能够使用,但不能反复冻融,因为这是竞争试剂盒,这与ji素试剂盒测定激su相似,存储在20 000,预涂板是20 000保存,然后觉得古怪,为什么这样的操作指南的要求,但正常的测试结果。当然,如果结果是正常的,如病毒检测试剂盒,尤其是正多面体病毒,应放在冰箱冷藏4 000。所以我们主张冻结后运行的时间盒。
在建立ELISA方法作反响动力学研究时,试验表明,两次抗原抗体反响一般在37℃经1~2小时,产物的天生可达顶峰。温育常选用的温度有43℃、37℃、室温顺4℃等。室温温育时要平置于操作台上即可。37℃是试验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的适宜温度。保温的方法除有的 ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均选用水浴,可将ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度敏捷平衡。操作时的室温应严格约束在划定的范围内,标准室温温度是指20~25℃,但具体操作时可根据仿单的要求操控温育。