TNFsR-Ⅱ人肿瘤坏死因子可溶性受体ⅡELISA方法

样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

包装规格：液体盒装 96T/48T
保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
人叉头框蛋白O3(FOXO3)酶联吸附测定试剂盒Salinicoccus alkaliphilusFABP7 (D8N3N) Rabbit mAb

人叉头框蛋白O4(FOXO4)酶联吸附测定试剂盒Pilidium concavumSignalSilence® PTP1B siRNA I

人叉头框蛋白P1(FOXP1)酶联吸附测定试剂盒金顶侧耳(榆黄蘑)Phospho-PLCγ1 (Ser1248) (D25A9) Rabbit mAb (PE Conjugate)

人叉头框蛋白P3(FOXP3)酶联吸附测定试剂盒褐球固氮菌SignalSilence® LRF/Pokemon siRNA I

人长效甲状腺(LATS)酶联吸附测定试剂盒 酿酒酵母GATA-1 (D52H6) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)

人肝配蛋白A4 (EFNA4)酶联吸附测定试剂盒竹喙球菌CD102/ICAM-2 (D7P2Q) Rabbit mAb

人肠三叶因子3(TFF3)酶联吸附测定试剂盒酿酒酵母ARD1A (E1J2B) Rabbit mAb

人转胶蛋白(TAGLN)酶联吸附测定试剂盒粉肉色杯伞CLCN3 (D8Y5Q) Rabbit mAb

人端粒酶相关蛋白1(TEP1)酶联吸附测定试剂盒越南芽孢杆菌SignalSilence® PI3 Kinase p110β siRNA I

人碱性唾液脯氨酸丰富蛋白2(PRB2)酶联吸附测定试剂盒 肠球菌属ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb

人超氧化物歧化酶1(SOD1)酶联吸附测定试剂盒互生枝顶孢FABP1 (D2A3X) XP® Rabbit mAb

人成骨生长肽/成骨多肽(OGP)酶联吸附测定试剂盒 解鸟氨酸拉乌尔菌FABP1 (D2A3X) XP® Rabbit mAb

人成熟促进因子(MPF)酶联吸附测定试剂盒 香菇SignalSilence® TNF-R1 siRNA I (Mouse Specific)

人成纤维生长因子23(FGF23)酶联吸附测定试剂盒腐皮镰孢菌TFIIE-α Antibody

人成纤维生长因子9(FGF9)酶联吸附测定试剂盒大肠埃希氏菌TNF-R1 (D3I7K) Rabbit mAb (Rodent Specific)
TNFsR-Ⅱ人肿瘤坏死因子可溶性受体ⅡELISA方法磷酸化活化复制因子2抗体Human LCA5 ELISA Kit大鼠性结合球蛋白（SHBG）ELISA试剂盒,

磷酸化活化复制因子2抗体Human LBR ELISA Kit大鼠相关血浆蛋白A（PAPP-A）ELISA试剂盒,

磷酸化周期末期促进复合蛋白APC1抗体Human LCE1A ELISA Kit大鼠骨成型蛋白7（BMP-7）ELISA试剂盒,

发育分化增强因子1抗体Human LAYN ELISA Kit猪白介素17（IL-17）ELISA试剂盒,

磷酸化发育分化增强因子1抗体Human LAX1 ELISA Kit绵羊白介素1（IL-1）ELISA试剂盒,

蛋白激酶B3Human LBR ELISA Kit兔子间粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA试剂盒,

肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体Human LCE1A ELISA Kit麦胚凝集素/凝集蛋白（WGA）ELISA试剂盒,

蛋白激酶A2抗体Human LCA5 ELISA Kit雌受体（ER）ELISA试剂盒--动物，人

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