MEC/CCL28人粘膜相关上皮趋化因子ELISA方法

公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

包装规格：液体盒装 96T/48T
保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
人糖磷脂酰肌(GPI)酶联吸附测定试剂盒  玫瑰绿色链霉菌OX40 (D1S6L) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

人糖皮质受体α(GRα)酶联吸附测定试剂盒 魔鬼弧菌TRXR1 (D1T3D) Rabbit mAb

人糖皮质受体β(GRβ)酶联吸附测定试剂盒 溥硬皮马勃POMP (D2X9S) Rabbit mAb

人糖原合成酶激酶3β(GSK3β)酶联吸附测定试剂盒 钩状木霉α-Actinin 4 (D7U5A) Rabbit mAb

人糖原合成酶激酶3α(GSK3α)酶联吸附测定试剂盒大豆慢生根瘤菌OX40 (D1S6L) Rabbit mAb (PE Conjugate)

人酰基化饥饿素(A-GHRL) 酶联吸附测定试剂盒多杀性巴氏杆菌Propionyl-Lysine [Prop-K] (D3A9R) Rabbit mAb

人色素C氧化酶(COX) 酶联吸附测定试剂盒粗柄羊肚菌VIMP (D1D1M) Rabbit mAb

人特异性巨噬武装因子(SMAF)酶联吸附测定试剂盒 大肠埃希菌Annexin A2 (D11G2) Rabbit mAb (PE Conjugate)

人补体因子H相关蛋白5(CFHR5)酶联吸附测定试剂盒变灰链霉菌CTLA-4 (D4E9I) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)

人轻肽铁蛋白(FTL)酶联吸附测定试剂盒秀珍菇HDAC4 (D8T3Q) Rabbit mAb

人重肽铁蛋白(FTH)酶联吸附测定试剂盒大肠埃希氏菌PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (E1J2J™) Rabbit mAb

人Pirin蛋白(PIR)酶联吸附测定试剂盒盔形毕赤酵母FAM3C (D1S2D) XP® Rabbit mAb

人多药耐药相关蛋白1(MRP1)酶联吸附测定试剂盒金横裂链霉菌IGF-I Receptor β Blocking Peptide

人突触足蛋白(SYNPO)酶联吸附测定试剂盒乳明串珠菌SLAMF6/CD352 Antibody

人突触素(SYP)酶联吸附测定试剂盒热带假丝酵母Jarid1B (E2X6N) Rabbit mAb
MEC/CCL28人粘膜相关上皮趋化因子ELISA方法alpha 1肾上腺素能受体B抗体Human HERC4 ELISA Kit小鼠嗜环蛋白/亲环素A（CyPA）ELISA试剂盒,

Bcl2 alpha蛋白抗体Human HINFP ELISA Kit小鼠雄烯二酮（ASD）ELISA试剂盒,

白抗原B相关转录蛋白5抗体Human HERPUD2 ELISA Kit小鼠白介素1β （IL-1β）ELISA试剂盒,

BTB/POZ结构域蛋白1（型肝炎病的NS5A反转录蛋白8）抗体Human HERC5 ELISA Kit大鼠CXC趋化因子受体3（CXCR3）ELISA试剂盒,

BCL7B蛋白抗体Human HESX1 ELISA Kit大鼠糖原磷酸化酶同工酶II（GP-II）ELISA试剂盒,

碱性核蛋白2(锌指蛋白basonuclin2)抗体Human HES5 ELISA Kit大鼠儿茶酚（CA）ELISA试剂盒,

B白血病/瘤蛋白7抗体Human HECTD1 ELISA Kit大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原（FⅧ-Ag）ELISA试剂盒,

先天性脂肪代谢障碍蛋白2抗体（常染色体显性遗传痉挛性截瘫17）Human HEXA ELISA Kit大鼠血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2/Flk-1）ELISA试剂盒,
操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制）���37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。