MAPK14人有丝分裂原活化蛋白激酶14ELISA方法

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

包装规格：液体盒装 96T/48T
保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
人甲状腺素受体α(THRα)酶联吸附测定试剂盒 枯草芽孢杆菌Naked1 (C30F10) Rabbit mAb

人核因子相关κB结合蛋白 (NFRκB)酶联吸附测定试剂盒微小杆菌Naked1 (C30F10) Rabbit mAb

人端锚聚合酶1 (TNKS1)酶联吸附测定试剂盒酿酒酵母Caspase-12 Antibody

人端锚聚合酶2 (TNKS2)酶联吸附测定试剂盒蚁巢伞属Caspase-12 Antibody

人多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)酶联吸附测定试剂盒金灰青霉TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb

人新蝶呤 (Neopterin)酶联吸附测定试剂盒 露湿漆斑菌TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb

人黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联吸附测定试剂盒根瘤菌Bortezomib

人孕烷受体(PXR)酶联吸附测定试剂盒浅绿气球菌Jagged2 (C83A8) Rabbit mAb

人花生四烯酸-15-脂加氧酶B(ALOX15B)酶联吸附测定试剂盒 小青霉TCF1/TCF7 (C46C7) Rabbit mAb

人V-Rel网状内皮增生病癌基因同源物B (RELB)酶联吸附测定试剂盒枯草芽孢杆菌Shh (C9C5) Rabbit mAb

人白介素24 (IL-24)酶联吸附测定试剂盒松杉灵芝Shh (C9C5) Rabbit mAb

人黑素瘤缺乏因子2(AIM2)酶联吸附测定试剂盒尖孢镰刀菌棉花专化型RPA32/RPA2 (4E4) Rat mAb

人CD63/四旋蛋白30 (TSPAN30/CD63)酶联吸附测定试剂盒梨头霉(+)RPA32/RPA2 (4E4) Rat mAb

人BTG3关联核蛋白(BANP)酶联吸附测定试剂盒凸脐儒孢菌Toll-like Receptor 1 Antibody

人cGMP依赖性蛋白激酶I (PRKG1)酶联吸附测定试剂盒古布尔班克氏菌属Toll-like Receptor 1 Antibody
MAPK14人有丝分裂原活化蛋白激酶14ELISA方法核突触蛋白β抗体Human GLYAT ELISA Kit人α2巨球蛋白（α2-MG）ELISA试剂盒,

BTRC2蛋白抗体Human GMCL1 ELISA Kit人孤腓肽（OFQ/N）ELISA试剂盒,

BEND3蛋白抗体Human GMDS ELISA Kit人二磷酸腺苷（ADP）ELISA试剂盒,

BEND4蛋白抗体Human GLIPR1L1 ELISA Kit人缪勒管抑制物质/抗缪勒管（MIS/AMH）ELISA试剂盒,

BEND6蛋白抗体Human GIMAP7 ELISA Kit小鼠白介素13（IL-13）ELISA试剂盒,

胎儿阿兹海默病抗原/核小体重塑因子抗体Human GINS3 ELISA Kit人球蛋白重链（IgH）ELISA试剂盒,

巴尔得-别德尔综合征相关蛋白2抗体Human GLIS1 ELISA Kit人软骨寡聚蛋白（COMP）ELISA试剂盒,

巴尔得-别德尔综合征相关蛋白5抗体Human GIPC1 ELISA Kit小鼠胰岛素样生长因子1（IGF-1）ELISA试剂盒,