FreeCarnitine人游离肉碱ELISA方法

公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

包装规格：液体盒装 96T/48T
保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
人色酸羟化酶1(TPH1)酶联吸附测定试剂盒食淀粉乳杆菌FosB Antibody

人磷酸化Tau蛋白(pMAPT/pTAU)ELISA kit冷海水黄杆菌Evi-1 Antibody

人类17-β-羟基类固脱氢酶10(HSD17β10)酶联吸附测定试剂盒球孢白僵菌PU.1 Antibody

人组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)酶联吸附测定试剂盒枯草芽孢杆菌斯氏亚种RPA70/RPA1 Antibody

人组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A(MICA)酶联吸附测定试剂盒秦氏蜜环菌MMP-9 (G657) Antibody

人血管内皮生长因子(VEGF)酶联吸附测定试剂盒嗜盐拟诺卡氏菌Myc-Tag Antibody

人吻素(KISS)酶联吸附测定试剂盒瘦弱盐扁平菌MELK Antibody

人内皮糖蛋白(ENG)检测试剂盒相思根瘤菌Myc-Tag (9B11) Mouse mAb

人信号肽，CUB域，EGF样1 (SCUBE1)酶联吸附测定试剂盒美澳型核果褐腐病菌Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb

人一氧化氮(NO)酶联吸附测定试剂盒  米曲霉Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb

人氧化型谷胱甘肽(GSSG)酶联吸附测定试剂盒白僵菌Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)

人过氧化氢酶(CAT)ELISA kit溶壁酶（lywallzyme）Raptor (24C12) Rabbit mAb

人总胆汁酸(TBA)酶联吸附测定试剂盒 大肠埃希氏菌Raptor (24C12) Rabbit mAb

人谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)酶联吸附测定试剂盒美澳型核果褐腐病菌SPAK Antibody

人胎盘生长因子(PGF) 酶联吸附测定试剂盒大肠埃希菌DAP1 Antibody
FreeCarnitine人游离肉碱ELISA方法骨架衔接蛋白BIN3抗体Human GEF-H1 ELISA Kit小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTn-Ⅰ）ELISA试剂盒,

双向染色体分裂蛋白1抗体Human GDPD5 ELISA Kit小鼠P物质（SP）ELISA试剂盒,

转录因子Brn3蛋白抗体Brn3αHuman GFPT1 ELISA Kit小鼠25羟基维生素D3（25（OH）D3/25 HVD3）ELISA试剂盒,

骨形态发生蛋白6抗体Human GDPD2 ELISA Kit大鼠嗜酸性粒阳离子蛋白（ECP）ELISA试剂盒,

脑钠素抗体Human GEFT ELISA Kit大鼠水通道蛋白5（AQP-5）ELISA试剂盒,

骨形态发生蛋白3抗体Human GEM ELISA Kit大鼠6酮前列腺素（6-K-PG）ELISA试剂盒,

抑凋亡基因bag1抗体Human GEMIN5 ELISA Kit大鼠抗甲状腺球蛋白抗体（ATGA/TGAB）ELISA试剂盒,

蛙皮素受体3抗体Human GEMIN4 ELISA Kit大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽（PⅢNT）ELISA试剂盒,
操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。