VEGF-A人血管内皮细胞生长因子AELISA方法

公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

包装规格：液体盒装 96T/48T
保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
猪酸性成纤维生长因子(AFGF/FGF1)酶联吸附测定试剂盒胶胞GADD45 alpha (D17E8) Rabbit mAb

猪膜桥蛋白酶联吸附测定试剂盒 美浓链霉RBAP46/RBAP48 Antibody

猪间变性瘤激酶(ALK)酶联吸附测定试剂盒 细黄链霉Phospho-ULK1 (Ser467) Antibody

猪胸腺依赖性抗原(TD-Ag)酶联吸附测定试剂盒水生鞘氨单胞Phospho-ULK1 (Ser467) Antibody

猪酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)酶联吸附测定试剂盒球孢白僵Mouse Heart Tissue Control Extracts

猪肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)酶联吸附测定试剂盒链霉MAD2L1 (D8A7) Rabbit mAb

猪单氧化酶(MAO)酶联吸附测定试剂盒米曲霉Cavin-1 (D8C1D) Rabbit mAb

猪肌球蛋白轻链1(MYL1)酶联吸附测定试剂盒水生屈曲杆Anti-Blue (2D2F11) Mouse mAb (HRP Conjugate)

猪三叶因子1(TFF1)酶联吸附测定试剂盒大孢子链霉TrkA and TrkB Antibody Sampler Kit

猪血小板激活因子(PAF)酶联吸附测定试剂盒Winogradskyella damuponensis YY1 (D5D9Z) Rabbit mAb

猪游离血红蛋白(f-Hb)酶联吸附测定试剂盒  茶云纹叶枯病KSR1 Antibody

猪靶向核糖核酸酶(TR)酶联吸附测定试剂盒轮枝（大豆胞囊线虫卵寄生真）SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers

猪血小板衍生生长因子受体α(PDGFRα)酶联吸附测定试剂盒粘盖牛肝*AIF Antibody

猪神经钙黏蛋白(NCAD)酶联吸附测定试剂盒 巴斯德毕赤酵母Rab5 (E6N8S) Mouse mAb

猪降钙素基因相关肽(CGRP)酶联吸附测定试剂盒 酿酒酵母α-Smooth Muscle Actin (1A4) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
VEGF-A人血管内皮细胞生长因子AELISA方法4号染色体开放阅读框22抗体Human CK-18/KRT18(CytokeRatin 18) ELISA Kit铅片

4号染色体开放阅读框14抗体Human CK-20/KRT20(CytokeRatin 20) ELISA Kit人转移因子（TF）ELISA试剂盒, TF ELISA kit

X染色体开放阅读框21抗体Human CYP2A6(Cytochrome P450 2A6) ELISA Kit人乙型肝炎病X抗原（HBxAg）ELISA试剂盒,HBxAg ELISA

磷酸化C端结合蛋白1抗体Human CYPA(Cyclophilin A) ELISA Kit人肠病（Enterovirus）ELISA试剂盒,Enterovirus ELISA

钙粘附蛋白8抗体Human CYPB(Cyclophilin B) ELISA Kit人解脲脲原体抗体（UU-Ab）ELISA试剂盒, UU-Ab ELISA

8号染色体开放阅读框192抗体Human CYSLTR2(Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit人骨形成蛋白（BMPs）ELISA试剂盒,BMPs ELISA

21号染色体开放阅读框87抗体Human DGAT1(Diacylglycerol O-acyltransferase 1) ELISA Kit人酪氨酸羟化酶（TH）ELISA试剂盒,

21号染色体开放阅读框91抗体Human D2R/DRD2(Dopamine Receptor D2) ELISA Kit人基质金属蛋白酶9/明胶酶B（MMP-9/Gelatinase B）ELISA试剂盒,
操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。