公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
|
STAT1人信号传导子及转录激活子1ELISA方法
|
英文名称
|
Human STAT1 ELISA Kit
|
货号
|
PH096720
|
包装规格:液体盒装 96T/48T
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L
|
5 号标准品
|
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
1200ng/L
|
4 号标准品
|
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
600ng/L
|
3 号标准品
|
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
300ng/L
|
2 号标准品
|
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
150ng/L
|
1 号标准品
|
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
猪B因子(BF)酶联吸附测定试剂盒 Fusarium venenatum NirenbergMouse Interleukin-1β (mIL-1β)
猪增殖相关蛋白2G4 (PA2G4)酶联吸附测定试剂盒短小芽孢杆TAK1 (D94D7) Rabbit mAb
猪肿瘤特异性移植抗原(TSTA)酶联吸附测定试剂盒 草木樨中华根瘤Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)
猪3-硝基酪氨酸(3-NT)酶联吸附测定试剂盒 光滑青霉Mouse Interleukin-4 (mIL-4)
猪粒集落激因子(CSF3/GCSF)酶联吸附测定试剂盒蜂房哈夫尼Mouse Interleukin-4 (mIL-4)
猪胶质系来源的神经营养因子(GDNF)酶联吸附测定试剂盒 豌豆根瘤Phospho-IκBα (Ser32) (14D4) Rabbit mAb (Biotinylated)
猪表皮生长因子受体(EGFR)酶联吸附测定试剂盒香菇SOCS3 (D6E1T) Rabbit mAb
猪骨成型蛋白3(BMP-3)酶联吸附测定试剂盒 孟氏假单胞Mouse Vascular Endothelial Growth Factor-164 (mVEGF<sub>164</sub> )
猪甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASP)酶联吸附测定试剂盒麦根腐平脐蠕孢Mouse Vascular Endothelial Growth Factor-164 (mVEGF<sub>164</sub> )
猪甲酰甲硫氨酸(fMet)酶联吸附测定试剂盒 灰葡萄孢*PCM-1 (G2000) Antibody
猪巨噬移动抑制因子(MIF)酶联吸附测定试剂盒球孢白僵T-bet/TBX21 (V365) Antibody
猪多配体聚糖1(SDC1)酶联吸附测定试剂盒克鲁斯假丝酵母Mouse Interleukin-6 (mIL-6)
猪核糖核酸酶(RNASE)酶联吸附测定试剂盒 桑炭疽盘Mouse Interleukin-6 (mIL-6)
猪血管紧张素II受体1(ANG II R1)酶联吸附测定试剂盒 乳酸乳球乳亚种Mouse Interleukin-7 (mIL-7)
猪泛素蛋白D(UBD)酶联吸附测定试剂盒粉拟青霉Mouse Interleukin-7 (mIL-7)
STAT1人信号传导子及转录激活子1ELISA方法磷酸化酪氨酸激酶C-SRC抗体Human TMEM126A(Transmembrane protein 126A) ELISA Kit人血管紧张素Ⅱ受体1(ANGⅡR-1)ELISA试剂盒,
酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗体Human ENHO(Adropin) ELISA Kit人促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA试剂盒,
半胱氨酸延伸蛋白α抗体Human TARBP2(RISC-loading complex subunit TARBP2) ELISA Kit人他克莫司(FK506)ELISA试剂盒,
磺基转移酶CSPS抗体Human DRAM1(DNA damage-regulated autophagy modulator protein 1) ELISA Kit人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)ELISA试剂盒,
富含半胱氨酸蛋白2抗体Human TBC1D1(TBC1 domain family member 1) ELISA Kit人胰岛素受体底物2(IRS-2)ELISA试剂盒,
软骨酸性蛋白1抗体Human TBPL1(TATA box-binding protein-like protein 1) ELISA Kit人杀肽B(CecB)ELISA试剂盒,
富含半胱氨酸蛋白结合蛋白抗体Human THAP4(THAP domain-containing protein 4) ELISA Kit人髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒,
CREB调节转录激活因子3抗体Human MBOAT4(Ghrelin O-acyltransferase) ELISA Kit小鼠抗酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒,
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。