样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
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APAF1人衔接蛋白酶活化因子1ELISA方法
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英文名称
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Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit
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货号
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PH096757
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包装规格:液体盒装 96T/48T
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及��远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
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5 号标准品
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150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
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1200ng/L
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4 号标准品
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150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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600ng/L
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3 号标准品
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150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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300ng/L
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2 号标准品
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150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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150ng/L
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1 号标准品
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150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
猪血管**素样蛋白1(ANGPTL1)酶联吸附测定试剂盒 灰肉色链霉CA9 (D10C10) Rabbit mAb
猪16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)酶联吸附测定试剂盒 桑帕约氏酵母CA9 (D47G3) Rabbit mAb
猪甲状腺自身抗体(THAA)酶联吸附测定试剂盒 屎肠球WTAP Antibody
猪鸟氨酸脱羧酶(ODC)酶联吸附测定试剂盒蛹虫草*BCL6 (D65C10) Rabbit mAb
猪轴突生长诱向因子1(Ntn1)酶联吸附测定试剂盒鞘氨盒属Phospho-β-Catenin (Ser552) (D8E11) Rabbit mAb
猪谷胱甘肽还原酶(GR)酶联吸附测定试剂盒巨型艾美耳球虫Phospho-β-Catenin (Ser552) (D8E11) Rabbit mAb
猪磷脂酶Cγ1(PLCγ1)酶联吸附测定试剂盒 葡萄座腔WIF1 (D50F9) Rabbit mAb
猪嗜环蛋白/亲环素B(CYPB)酶联吸附测定试剂盒 金龟子绿僵小孢变种Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
猪黑色素瘤关联ME20 (ME20M)酶联吸附测定试剂盒栗疫Thymidylate Synthase (TS106) Mouse mAb
猪血管紧张素II受体2(ANGⅡR2)酶联吸附测定试剂盒 鲁杰氏Phospho-Stat6 (Tyr641) (D8S9Y) Rabbit mAb
猪多巴色素异构酶(DT)酶联吸附测定试剂盒 大肠埃希氏PKD3/PKCν (D57E6) Rabbit mAb
猪聚集蛋白聚糖(AGC)酶联吸附测定试剂盒 枯草芽孢杆Huntingtin (D7F7) XP® Rabbit mAb
猪趋化素样因子超家族成员6(CKLFSF6)酶联吸附测定试剂盒炭疽芽胞杆RAIG1 Antibody
猪成纤维生长因子结合蛋白2(FGFBP2)酶联吸附测定试剂盒栖藻海杆状Plexin A2 (D42B5) Rabbit mAb
猪前蛋白转化酶9(PCSK9)酶联吸附测定试剂盒 芥黄蜜环N6-Methyladenosine (m6A) (D9D9W) Rabbit mAb
APAF1人衔接蛋白酶活化因子1ELISA方法16号染色体开放阅读框48抗体Human APLN36(Apelin-36) ELISA Kit羧甲基纤维素CM-52
色素P450 19抗体Human MT2A(Metallothionein-2) ELISA Kit无水偏钒酸钠
CD28抗体Human NRG-1(Neuregulin 1) ELISA Kit人角蛋白13(CK-13)ELISA试剂盒, CK-13 ELISA kit
1号染色体开放阅读框195抗体Human TUBB(Tubulin beta chain) ELISA Kit人卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒, OVA sIgG ELISA kit
NK抑制性受体2DL1抗体Human MUCL1(Mucin-like protein 1) ELISA Kit人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒, PL12/Ala
3号染色体开放阅读框67抗体Human CD3E(T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain) ELISA Kit人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)ELISA试剂盒,ARPA/Rib-P ELISA
κ-酪蛋白抗体Human ERCC1(DNA excision repair protein ERCC-1) ELISA Kit人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒, PCT ELISA
唾液酸结合性球蛋白样凝集素7抗体Human NRP1(Neuropilin-1) ELISA Kit人全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒,i-PTH ELISA