样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
|
人胃癌标志物ELISA试剂盒
|
英文名称
|
human gastric carcinoma Marker ELISA Kit
|
货号
|
PH096839
|
包装规格:液体盒装 96T/48T
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
|
5 号标准品
|
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
1200ng/L
|
4 号标准品
|
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
600ng/L
|
3 号标准品
|
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
300ng/L
|
2 号标准品
|
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
150ng/L
|
1 号标准品
|
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
猴GATA结合蛋白5(GATA5)酶联吸附测定试剂盒白地霉SQSTM1/p62 (D10E10) Rabbit mAb (IF Preferred)
猴表皮转谷氨酰酶(TGM3)酶联吸附测定试剂盒郝氏链霉SignalSilence® Glucocorticoid Receptor siRNA II
猴纤维蛋白原β(FGβ)酶联吸附测定试剂盒嗜肉考克氏cdc2 Antibody
猴甲状腺素(T4)酶联吸附测定试剂盒巴氏梭KEAP1 (D1G10) Rabbit mAb
猴甲状腺结合球蛋白(TBG)酶联吸附测定试剂盒 大隐球酵母SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers
猴多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)酶联吸附测定试剂盒糙皮侧耳DOT1L (D1W4Z) Rabbit mAb
猴激肽释放酶8(KLK8)酶联吸附测定试剂盒 中慢生华癸根瘤PLEKHM1 (E9S3Q) Rabbit mAb
猴肌钙蛋白T(Tn-T)酶联吸附测定试剂盒 黑曲霉SimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primers
猴降钙素受体(CTR)酶联吸附测定试剂盒 葡萄球属IRAK1 (D51G7) Rabbit mAb (PE Conjugate)
猴趋化素样因子超家族成员8(CKLFSF8)酶联吸附测定试剂盒短芽孢杆Blue Loading Buffer Pack
猴金属硫蛋白2 (MT2)酶联吸附测定试剂盒异常威克汉姆酵母Red Loading Buffer Pack
猴胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)酶联吸附测定试剂盒 酿酒酵母PHF19 Antibody
猴血管紧张素II受体2抗体(ANGⅡR2-Ab)酶联吸附测定试剂盒 Bacillus CD74 (D5N3I) XP® Rabbit mAb
猴表皮调节素(EREG)酶联吸附测定试剂盒酿酒酵母CD74 (D5N3I) XP® Rabbit mAb
猴基质裂解蛋白/基质溶素(MAT)酶联吸附测定试剂盒链格孢Biotinylated Protein Ladder Detection Pack
人胃癌标志物ELISA试剂盒磷酸化蓬乱蛋白2抗体Human PELI3 (E3 ubiquitin-protein ligase pellino homolog 3) ELISA KIT人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒,
转录下调蛋白1抗体Human MYH11(Myosin-11) ELISA Kit人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒,IL-6 ELISA kit
脱氢酶/还原酶家族成员2抗体Human PROCA1 (Protein PROCA1) ELISA KIT人间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒,
牙本质磷蛋白抗体Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) ELISA KIT人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒,MUC5B ELISA kit
Dermokine β蛋白抗体Human PPP1R13B (Apoptosis-stimulating of p53 protein 1) ELISA KIT人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒,MUC7 ELISA kit
DPCR1蛋白抗体Human POMK (Protein O-mannose kinase) ELISA KIT人抗钙蛋白酶抑素抗体(ACAST-DⅣ)ELISA itACAST-DⅣELISA it
表皮源性蛋白6抗体Human PKN1 (Serine/threonine-protein kinase N1) ELISA KIT人抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA试剂盒, AIRA ELISA kit
双特异性蛋白磷酸酶7抗体Human METRN(Meteorin) ELISA Kit人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒,GAD-Ab ELISA