样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
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Hepc25人铁调素25ELISA检测试剂盒
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英文名称
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Human Hepcidin 25,Hepc25 ELISA Kit
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货号
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PH096895
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包装规格:液体盒装 96T/48T
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
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5 号标准品
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150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
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1200ng/L
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4 号标准品
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150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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600ng/L
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3 号标准品
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150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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300ng/L
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2 号标准品
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150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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150ng/L
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1 号标准品
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150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
猴神经营养因子3(NT-3)酶联吸附测定试剂盒丝状支原体山羊亚种MitoTracker® Deep Red FM
猴蛋白磷酸酶1调控亚基1A(PPP1R1A)酶联吸附测定试剂盒晶粒鬼伞Nucleolin (E5M7K) Mouse mAb
猴中性粒碱性磷酸酶(NAP)酶联吸附测定试剂盒青色链霉SirT5 (D5E11) Rabbit mAb
猴热休克转录因子1(HSF1)酶联吸附测定试剂盒 青霉MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb
猴γ干扰素诱导单核因子(MIγ/CXCL9)酶联吸附测定试剂盒血杆RanBP1 Antibody
猴轻肽神经丝蛋白(NEFL)酶联吸附测定试剂盒三叶胶灰星Phospho-Threonine Antibody (P-Thr-Polyclonal) (Sepharose Beads)
猴血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)酶联吸附测定试剂盒假灰链霉SirT5 (D8C3) Rabbit mAb
猴胃粘液素(GM)酶联吸附测定试剂盒 佛雷德里克斯堡假单胞LysoTracker® Green DND-26
猴胸腺依赖性抗原(TD-Ag)酶联吸附测定试剂盒戴尔福特属Nanog (D1G10) Rabbit mAb (Mouse Specific; ChIP Formulated)
猴黑色素瘤关联硫酸软骨素蛋白聚糖(MCSP)酶联吸附测定试剂盒 大肠埃希氏Syk (4D10) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
猴促肾上皮质释放(CRH)酶联吸附测定试剂盒 长根静灰球ER-Tracker™ Green (BODIPY® FL Glibenclamide)
猴原钙黏素β16(PCDHβ16)酶联吸附测定试剂盒 虎掌*Cleaved Caspase-3 (Asp175) (D3E9) Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)
猴水通道蛋白2(AQP-2)酶联吸附测定试剂盒 枯草芽孢杆Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (PE Conjugate)
猴心肌肌钙蛋白T(c/TNNT2)酶联吸附测定试剂盒 传染性****病CD8α (2.43) Rat mAb (PE-Cy7® Conjugate)
猴锚蛋白B(Ank-B)酶联吸附测定试剂盒 FormosaNKX2.5 (E1Y8H) Rabbit mAb
Hepc25人铁调素25ELISA检测试剂盒磷酸化雌受体α抗体Human FCHSD2 (F-BAR and double SH3 domains protein 2) ELISA KIT秋水仙
磷酸化真核翻���起始因子4B抗体Human SLC30A3(Zinc transporter 3) ELISA Kit6-磷酸葡萄糖钡盐
真核翻译起始因子4B抗体Human EWSR1 (RNA-binding protein EWS) ELISA KIT2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸
磷酸化转录接头蛋白EP300抗体Human EXO5 (Exonuclease V) ELISA KIT2-氨基-5-萘酚-7-磺酸
磷酸化上皮癌转化蛋白2抗体Human FCHO1 (F-BAR domain only protein 1) ELISA KIT2,2-二羟基二硫代-6,6-联萘
磷酸化真核翻译起始因子4G抗体Human FCHO2 (F-BAR domain only protein 2) ELISA KIT人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒, Sam ELISA kit
表皮生长因子受体5抗体Human EXTL1 (Exostosin-like 1) ELISA KIT人巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒,
电子转移黄素蛋白β肽/黄素蛋白抗体Human FERMT1 (Fermitin family homolog 1) ELISA KIT人丙二醛(MDA)ELISA试剂盒,MDA ELISA kit