PAK4人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PAK4ELISA方法

样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

包装规格：液体盒装 96T/48T
保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
兔睾酮受体(TR)酶联吸附测定试剂盒室内外电子温湿度计BSURI (HAEIII)

兔肌营养**蛋白(DMD)酶联吸附测定试剂盒 坚强芽孢杆CFR9I (XMAI)

兔I型胶原交联氨基端肽(NTXI)酶联吸附测定试剂盒  黄孢原毛平革CFR9I (XMAI)

兔B活化因子 (BAFF/CD257/TNFSF13B)酶联吸附测定试剂盒 绿色木霉CFR10I (BSRFI)

兔黑素转铁蛋白(MFI2)酶联吸附测定试剂盒柠檬黄色红色杆CFR13I (SAU96I)

兔粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)酶联吸附测定试剂盒  橙黄红酵母CFR42I (SACII)

兔糖盏蛋白(GC)酶联吸附测定试剂盒季也蒙假丝酵母CFR42I (SACII)

兔颗粒酶B(GzmB)酶联吸附测定试剂盒 酿酒酵母CFR42I (SACII)

兔核孔蛋白153kda(NUP153)酶联吸附测定试剂盒黑木耳CSP6I (CVIQI)

兔辅肌动蛋白α3(ACTN3)酶联吸附测定试剂盒黑腐皮壳DRAI

兔弹性蛋白酶2B(ELA2B)酶联吸附测定试剂盒  蜡状芽孢杆DRAI, HC

兔前胶原C端蛋白酶增强子1(PCPE1)酶联吸附测定试剂盒解脂耶氏酵母EAM1104I (EARI)

兔补体因子B(CFB)酶联吸附测定试剂盒 球托霉属w5株EAM1104I (EARI)

兔蛋白酶激活受体2(PAR2)酶联吸附测定试剂盒孟氏假单胞EAM1105I (AHDI)

兔球蛋白A Fc段受体(FcαR/CD89)酶联吸附测定试剂盒 根瘤ECL136II (ECOICRI)
PAK4人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PAK4ELISA方法G蛋白偶联受体34抗体Human USP1 ELISA Kit人登革热抗体(DF-Ab)Elisa测定试剂盒

G蛋白偶联受体35抗体Human USP14 ELISA Kit薏苡仁LAMP鉴定试剂盒

G蛋白偶联受体37/帕金森相关内皮素���体样受体抗体Human UROD ELISA Kit人基质金属蛋白酶4(MMP-4)Elisa测定试剂盒

G蛋白偶联受体40抗体Human SERPINB6(Serpin B6) ELISA Kit人球蛋白j链(Ig-j)Elisa测定试剂盒

G蛋白偶联受体43抗体Human UROC1 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)Elisa测定试剂盒

G蛋白偶联受体44抗体Human USE1 ELISA Kit小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)Elisa测定试剂盒

G蛋白偶联受体45抗体Human UROS ELISA Kit小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)Elisa测定试剂盒

同源盒蛋白GSC抗体Human UQCRC1 ELISA Kit小鼠促肾上腺皮质(ACTH)Elisa测定试剂盒