样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
|
T3人三碘甲状腺原氨酸ELISA检测试剂盒
|
英文名称
|
Human Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit
|
货号
|
PH097105
|
包装规格:液体盒装 96T/48T
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
|
5 号标准品
|
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
1200ng/L
|
4 号标准品
|
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
600ng/L
|
3 号标准品
|
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
300ng/L
|
2 号标准品
|
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
150ng/L
|
1 号标准品
|
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202107/202107021415113531.jpg)
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
豚鼠重肽铁蛋白(FTH)酶联吸附测定试剂盒多主葡萄壳Human IL-4 (Interleukin 4) ELISA Kit
豚鼠肠三叶肽因子3(TFF3)酶联吸附测定试剂盒耐盐枝孢Human IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit
豚鼠触珠蛋白相关蛋白(HPR)酶联吸附测定试剂盒 肉桂色链霉Human IL-10 (Interleukin 10) ELISA Kit
豚鼠前列腺素E受体2(EP2)酶联吸附测定试剂盒土壤弯孢Human IL-13 (Interleukin 13) ELISA Kit
豚鼠粘蛋白5AC(MUC5AC)酶联吸附测定试剂盒维多利亚隐球酵母Human IL-17 (Interleukin 17) ELISA Kit
豚鼠酮酸脱氢酶β(PDHβ)酶联吸附测定试剂盒假单胞Human IL-22 (Interleukin 22) ELISA Kit
豚鼠白介素13(IL-13)酶联吸附测定试剂盒阪崎肠杆Human IL-23 (Interleukin 23) ELISA Kit
豚鼠脂多糖结合蛋白(LBP)酶联吸附测定试剂盒 多分枝毛霉Human IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit
豚鼠甲状腺素抗体(TAb)酶联吸附测定试剂盒角形小孔Human TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit
豚鼠周期素D1(CCND1)酶联吸附测定试剂盒 枯草芽孢杆Human TGF-β1 (Transforming Growth Factor Beta 1) ELISA Kit
豚鼠瘦素(LEP)酶联吸附测定试剂盒海仙属Human VEGF-A (Vascular Endothelial Cell Growth Factor A ) ELISA Kit
豚鼠晶体蛋白(CLC)酶联吸附测定试剂盒 蟹味菇(白)Human EREG (Epiregulin) ELISA Kit
豚鼠趋化因子CC受体样蛋白1(CCRL1)酶联吸附测定试剂盒异常威克汉姆酵母Human LEP (Leptin) ELISA Kit
豚鼠信号素4C (SEMA4C)酶联吸附测定试剂盒 乌鲁木齐奇异球Human Bcl-2 (B-cell Leukemia/Lymphoma 2) ELISA Kit
豚鼠轴蛋白抑制蛋白2(AXIN2)酶联吸附测定试剂盒图画大洋芽孢杆Human MAU (Microalbuminuria) ELISA Kit
T3人三碘甲状腺原氨酸ELISA检测试剂盒��休克蛋白β7抗体Human SPACA1 ELISA Kit羌活(宽叶羌活)
/钠超化激活环核苷酸门控通道蛋白3抗体Human SPDYA ELISA Kit盐酸丙哌维林
铁调节蛋白25抗体Human SPHK1 ELISA Kit盐酸阿呋唑嗪
HD域内含蛋白2抗体Human CADM3(Cell adhesion molecule 3) ELISA Kit硝呋太尔杂质A
艾滋病病p55抗体Human SPHK1-Phospho-Ser225 ELISA Kit小鼠环磷酸鸟苷(cGMP)Elisa测定试剂盒
造血激酶抗体Human SPHK2 ELISA Kit鸡β内酰酶(β-lactamase)Elisa测定试剂盒
HEAT重复内含蛋白5B蛋白抗体Human SPI1 ELISA Kit肌动蛋白α抗体流式组化
缺氧诱导基因1B蛋白抗体Human SPATA1 ELISA Kit癌基因抗体流式组化c-erbB-4