样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
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Hyl人羟赖氨酸ELISA检测试剂盒
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英文名称
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Human hydroxylysine,Hyl ELISA Kit
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货号
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PH097194
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包装规格:液体盒装 96T/48T
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
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5 号标准品
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150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
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1200ng/L
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4 号标准品
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150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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600ng/L
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3 号标准品
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150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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300ng/L
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2 号标准品
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150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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150ng/L
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1 号标准品
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150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
鸡芳基硫酸酯酶B(ASB)酶联吸附测定试剂盒 霍氏肠杆Human PGD2-MOX (Prostaglandin D2-Methoxime) ELISA Kit
鸡胰蛋白酶原II(Try2)酶联吸附测定试剂盒 芽胞杆Human FPR2 (Formyl Peptide Receptor 2) ELISA Kit
鸡胆固酯转移蛋白(CETP)酶联吸附测定试剂盒短小芽孢杆Human PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit
鸡视黄酸诱导基因/RIG-1样受体(RLR)酶联吸附测定试剂盒 三宝垄根霉Human PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) ELISA Kit
鸡调节正常T表达和分泌因子(RANTES)酶联吸附测定试剂盒 酿酒酵母Human PTHrP (Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit
鸡雄诱导蛋白1(AIG1)酶联吸附测定试剂盒 季也蒙迈耶氏酵母Human TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) ELISA Kit
鸡胃脂酶 (LIPF)酶联吸附测定试剂盒薄花边伞1-5Human PLP (Parathyroid Hormone-Like Protein) ELISA Kit
鸡半乳凝集素7(GAL7)酶联吸附测定试剂盒蛹虫草Human TSI (Thyroid Stimulating Immunoglobulin) ELISA Kit
鸡畸胎瘤衍生生长因子1(TDGF1)酶联吸附测定试剂盒燕麦嗜酸西瓜亚种*Human THAA (Thyroid Hormone Autoantibody) ELISA Kit
鸡蛋白激酶C-ζ(PKCζ)酶联吸附测定试剂盒皮生毛霉Human CD276 (Cluster of Differentiation 276) ELISA Kit
鸡外信号调节激酶2(ERK2)酶联吸附测定试剂盒大肠杆Human TBG (Thyroxine Binding Globulin) ELISA Kit
鸡核孔蛋白205kda(NUP205)酶联吸附测定试剂盒产黄青霉Human PAH (Phenylalanine Hydroxylase) ELISA Kit
鸡蛋白磷酸酶(PP)酶联吸附测定试剂盒佛雷德里克斯堡假单胞Human TG (Thyroglobulin) ELISA Kit
鸡胰岛素自身抗体(IAA)酶联吸附测定试剂盒鞘氨盒属Human T4 (Thyroxine) ELISA Kit
鸡转运蛋白2(TNPO2)酶联吸附测定试剂盒黑木耳Human TAB (Thyroxine Antibody) ELISA Kit
Hyl人羟赖氨酸ELISA检测试剂盒FBXL11蛋白抗体Human IFI35(Interferon-induced 35 kDa protein) ELISA Kit激活的脱氧核糖核酸酶抗体流式组化
球蛋白超家族成员21抗体Human RFC4 ELISA Kit半胱酸蛋白酶蛋白-13抗体流式组化
白介素9抗体Human RECQL4 ELISA Kit兔抗瓜氨酸环肽抗体流式组化
乙酰乳酸合成酶蛋白抗体Human RECQL5 ELISA KitCD17抗体流式组化
异柠檬酸脱氢酶1抗体Human RFC5 ELISA Kit抗L-瓜氨酸抗体流式组化
IKK激酶相互作用蛋白抗体Human REDD1(Protein regulated in development and DNA damage response 1) ELISA Kit食欲素受体抗体流式组化
磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗体Human RFFL ELISA Kit鼠抗人前列腺特异性抗原抗体流式组化
白介素8抗体Human REEP1 ELISA KitD-赖氨酸盐酸盐