样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
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CF6人偶联因子6ELISA检测试剂盒
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英文名称
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Human coupling factor 6,CF6 ELISA Kit
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货号
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PH097260
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包装规格:液体盒装 96T/48T
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
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5 号标准品
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150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
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1200ng/L
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4 号标准品
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150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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600ng/L
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3 号标准品
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150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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300ng/L
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2 号标准品
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150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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150ng/L
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1 号标准品
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150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
鸡线粒体超氧化物歧化酶2(SOD2)酶联吸附测定试剂盒宇佐美曲霉Mouse FGF21(Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit
鸡多聚球蛋白受体(PIGR/SC)酶联吸附测定试剂盒掌状花耳Mouse Flt3L (FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) ELISA Kit
鸡膜桥蛋白(Ponticulin)酶联吸附测定试剂盒 微小杆Mouse G-CSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit
鸡八聚体结合转录因子4(OBTF4)酶联吸附测定试剂盒委内瑞拉链霉Mouse GM-CSF (Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit
鸡糖化白蛋白(GA)酶联吸附测定试剂盒 节杆属Mouse IFN-β (Interferon Beta) ELISA Kit
鸡质膜膜泡关联蛋白 (PLVAP)酶联吸附测定试剂盒环状芽胞杆Mouse IGF-1 (Insulin-like growth factor 1) ELISA Kit
鸡抗缪勒管(AMH)酶联吸附测定试剂盒稻平脐孺孢Mouse IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3) ELISA Kit
鸡血小板相关球蛋白(PAIg)酶联吸附测定试剂盒 生脂固氮螺Mouse IL-1α (Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit
鸡丝氨酸/苏氨酸激酶39(STK39)酶联吸附测定试剂盒 枯草芽孢杆Mouse IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit
鸡生长受体(GHR)酶联吸附测定试剂盒植物乳杆植物亚种Mouse IL-1ra (Interleukin 1 Receptor Antagonist) ELISA Kit
鸡纤维蛋白原β(FGβ)酶联吸附测定试剂盒草螺属Mouse LEP (Leptin) ELISA Kit
鸡血红蛋白β(HBβ)酶联吸附测定试剂盒 苔类芽孢杆Mouse LIF (Leukemia Inhibitory Factor) ELISA Kit
鸡肾上腺髓质素(ADM)酶联吸附测定试剂盒 斯高特白冬孢酵母Mouse IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit
鸡转化生长因子β1(TGF-β1)酶联吸附测定试剂盒漆柄小孔Mouse IL-4 (Interleukin 4) ELISA Kit
鸡信号素3B (SEMA3B)酶联吸附测定试剂盒 巨型艾美耳球虫Mouse IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit
CF6人偶联因子6ELISA检测试剂盒层粘蛋白α4抗体(Lamininα4)Human PIR ELISA KitL-亮氨酸甲酯盐酸盐
层粘蛋白α4抗体(Lamininα4)Human PITPNB ELISA Kit6-氨基正己酸
脂质运载蛋白1抗体Human PIGT ELISA Kit1,2,3-苯骈三氮唑
趋化因子抗体Human PIGS ELISA Kit2′-脱氧鸟苷-5′-二磷酸三钠盐
低密度脂蛋白受体5样蛋白抗体Human PIGZ ELISA Kit甲基磺酸甲酯
富含亮氨酸重复跨膜神经元蛋白3抗体Human PIH1D1 ELISA Kit三乙烯四六乙酸
扁豆凝集素Human PIK3C2G ELISA Kit十五烷酸
磷酸化富亮氨酸重复激酶2抗体Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit十三烷酸