eNOS-3人内皮型一氧化氮合酶3ELISA方法

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

包装规格：液体盒装 96T/48T
保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
绵羊甲基化酶(Methylase)酶联吸附测定试剂盒果生链核盘Mouse OC/BGP (Osteocalcin) ELISA Kit

绵羊β-促脂素(β-LPH)酶联吸附测定试剂盒 大肠埃希氏Mouse OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit  

绵羊骨形成蛋白6(BMP-6)酶联吸附测定试剂盒 酿酒酵母Mouse ODF (Osteoclast Differentiation Factor) ELISA Kit

绵羊内皮型一氧化氮合成酶(NOS3/eNOS)酶联吸附测定试剂盒 奥氏蜜环Mouse ON (Osteonectin) ELISA Kit

绵羊过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)酶联吸附测定试剂盒恶臭假单胞Mouse OPGL (Osteoprotegerin Ligand) ELISA Kit

绵羊SPARC样蛋白1(SPARCL1)酶联吸附测定试剂盒链格孢Mouse OVA sIgE (Ovalbumin Specific IgE) ELISA Kit

绵羊趋化素样因子超家族成员8(CKLFSF8)酶联吸附测定试剂盒大肠埃希Mouse CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit

绵羊集聚蛋白(AGRN)酶联吸附测定试剂盒 秀珍菇Mouse pIκBα (Phospho-Inhibitory Subunit of NF Kappa B Alpha) ELISA Kit

绵羊组织因子途径抑制因子(TFPI)酶联吸附测定试剂盒大肠杆Mouse OLAb (Oxidized Lowdensity Lipoprotein Antibody) ELISA Kit

绵羊抗中性粒弹性蛋白酶抗体(ANEA)酶联吸附测定试剂盒灰色链霉灰色亚种Mouse MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit

绵羊载脂蛋白H(ApoH)酶联吸附测定试剂盒  枯草芽孢杆Mouse PP (Pancreatic Polypeptide) ELISA Kit  

绵羊真核翻译起始因子3a(eIF3a)酶联吸附测定试剂盒  脱叶链霉Mouse PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit

绵羊补体成分7(C7)酶联吸附测定试剂盒卷枝毛霉Mouse PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) ELISA Kit  

绵羊粘蛋白5B(MUC5B)酶联吸附测定试剂盒埃里希正青霉Mouse PTHrP (Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit

绵羊卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)酶联吸附测定试剂盒 烬灰吸水链霉Mouse Pax (Paxillin) ELISA Kit  
eNOS-3人内皮型一氧化氮合酶3ELISA方法成熟T增殖蛋白1抗体Human NR2C1(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 1) ELISA Kit20（S）-原人参三醇

丝裂原活化蛋白激酶8相互作用蛋白1抗体Human NR2B ELISA KitBOC-Nim-苄基-L-组氨酸

肌球蛋白轻链6抗体Human NOVA2 ELISA KitD-丝氨酸

磷酸化肌增强因子2C抗体Human F2R(Proteinase-activated receptor 1) ELISA KitDL-高苯丙氨酸

磷酸化黑色素瘤粘附分子CD146抗体Human NOX3(NADPH oxidase 3) ELISA Kit新霉素硫酸盐

肌增强因子2C抗体Human NOXA2/p67phox ELISA Kit2-硫代酸

促黑γ1抗体Human NMUR1 ELISA Kit氟化钠

小鼠抗酮酸激酶-M2抗体Human NNT ELISA Kit原钒酸钠