骨特异性碱性磷酸酶试剂盒

公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
成骨相关转录因子抗体人桩蛋白osterix antibody

泛素蛋白人小表皮粘蛋白ubiquitin

苹果酸脱氢酶人类似60S核糖体蛋白L21Malate Dehydrogenase

质膜H+-ATPase人类粘蛋白2PM-H+-ATPase

液泡膜H+-ATPase人MAX二聚化蛋白1V-H+-ATPase

液泡膜H+-PPase人水闸蛋白14V-H+-PPase

质膜H+-ATPase人可溶性半乳糖苷结合凝集素3PM-H+-ATPase

液泡膜H+-ATPase人主要穹窿蛋白V-H+-ATPase

液泡膜H+-PPase人泛素蛋白DV-H+-PPase

CC趋化因子受体3人toll样受体2CC-chemokine receptor 3

天冬酰胺內肽酶年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2Legumain

高密度脂蛋白胆固醇人卷曲蛋白8high-density-lipoprotein cholesterol

低密度脂蛋白胆固醇人蜗牛同源物2low-density-lipoprotein cholesterol

无翅型MMTV整合位点家族成员5A人高尔基蛋白73Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5A

蛋白激酶Cα人TU3A蛋白protein kinase C α
骨特异性碱性磷酸酶试剂盒甲基三辛基氯化铵(R=C8-C10)  90%2,4,6-三氟苯酸 96%Anti-IL-6  白介素6抗体

N-丁基溴化吡啶 99%2-(三氟甲基)苯酸  97%Anti-IL-7  白介素7抗体

苄基三丁基氯化铵 98%4-三氟甲氧基苯酸  98%Anti-IL-6R Alpha  白介素6受体α抗体

1-丁基吡啶盐酸盐 98%3-(三氟甲氧基)苯酸  98%Anti-IL-6R Beta/CD130/gp130  白介素6受体β抗体

苄基三丁基溴化铵 99%2-(三氟甲氧基)苯酸 97%Anti-IL-8/CXCL8  白介素8抗体

苄基三苯基溴化膦 98%2,4,5-三溴咪唑 98%Anti-IL-8/CXCL8 (mouse, rat)  白介素8抗体 （小鼠，大鼠）

丁基三苯基氯化膦 98%3,4,5-三氟苯酸 97%Anti-IL-7Ra/CD127  白介素-7受体a抗体

苄基基溴化铵 98%2,3,4-氧基苯酸 98%Anti-Mitofilin/IMMT  线粒体内膜蛋白抗体
操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。