样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
|
固醇调节元件结合蛋白1试剂盒
|
规格
|
48T/96T
|
货号
|
BH-0012176
|
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
|
5 号标准品
|
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
1200ng/L
|
4 号标准品
|
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
600ng/L
|
3 号标准品
|
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
300ng/L
|
2 号标准品
|
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
150ng/L
|
1 号标准品
|
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
高迁移率族蛋白B2人生长相关蛋白43High mobility group protein B1
总超氧化物歧化酶大鼠cAMP反应元件结合蛋白total Super Oxidase Dimutase
抗核IGG抗体人聚集蛋白Anti-nuclear IGG Antibody
粘蛋白5AC人Agouti相关蛋白Mucin-5 subtype AC
果糖胺人膜辅蛋白fructosamine
双氢睾酮人延伸蛋白ADihydro testosterone
天蚕素P1人酰化激蛋白cecropins P1
脂多糖人性/通透性增加蛋白Lipopolysaccharides
布鲁氏杆菌病抗体人外基质磷酸糖蛋白brucellosis antibody
游离原卟啉人复制蛋白AFree erythrocyte proloporphyrin
谷胱甘肽氧化还原酶人软骨寡聚基质蛋白glutathione reductase
精氨酸脱亚胺酶人抗原提呈相关转运蛋白/T活化蛋白Arginine Deiminase
胰岛细胞抗体人抑制酸性蛋白islet cell antibody
蛋白络氨酸磷酸酶抗体人麦角蛋白IgAIA2A
铁调素人发动蛋白2Hepcidin
固醇调节元件结合蛋白1试剂盒四苯基溴化膦 98%乙烯利 80%Anti-Integrin beta 7 整合素β7抗体
四乙基氢氧化铵 AR,25%水溶液无水四氯化锡 ARAnti-Integrin Alpha V + Beta1 整合素αVβ1抗体
四基化铵 98%三苯基氯化锡 96%Anti-Integrin Alpha V + Beta 3 整合素αVβ3抗体
四基氢氧化铵 1.0 M in H2O乙烯利 80%Anti-Integrin Alpha V + Beta 5 整合素αVβ5抗体
四甲基硫酸氢铵 99%赤霉素 >90% (HPLC)Anti-Integrin alpha E/CD103 整合素αE抗体
四甲基醋酸铵 90%蒙脱土KSF 蒙脱土KSF ,10 m²/gAnti-IQGAP1 支架蛋白抗体
四乙基氟化铵(二水) 98%N-乙基吗啉 99%Anti-IRF-1 干扰素调节因子1抗体
三盐酸盐 98%N-乙基吗啉 蛋白测序, ≥99.5% (GC)Anti-IRAK 白介素-1受体相关激酶1/2抗体