细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
产品名称
|
兔胸腺细胞
|
规格
|
详见说明书
|
货号
|
BH-8010799
|
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培��基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
细胞处理方法:
以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理,如需要更详细技术指导。
一.贴壁细胞
客户接收到细胞,用75%的酒精(建议配制75%酒精的水是过的)培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。
显微镜观察细胞,当细胞融汇至80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2 培养。
二.悬浮细胞
1. 接收到细胞,用75%的酒精(建议配制75%酒精的水是过的)培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。
3. 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。
5. 1000rpm,5min离心,重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2培养。
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品介绍 Olfactomedin-4, also known as G-CSF-stimulated clone 1 protein, Antiapoptotic protein GW112, and OLFM4, is a secreted protein which contains one olfactomedin-like domain. OLFM4 is expressed during myeloid lineage development. It is strongly expressed in the prostate, small intestine and colon and moderately expressed in the bone marrow and stomach. OLFM4 is highly expressed in pancreatic cancer tissues and shows an elevated expression level during the early S phase of the cell cycle. It is also expressed at high levels in stomach cancer and colon cancer tissues. Inhibition of ROS or the ERK pathway remarkably decreased G-CSF-induced OLFM4 expression. OLFM4 is an antiapoptotic factor that promotes tumor growth. OLFM4 promotes proliferation of pancreatic cancer cells by favoring the transition from the S to G2/M phase. OLFM4 also facilitates cell adhesion. Induction of OLFM4 in cancer cells was reported to have a novel antiapoptotic action via binding to the potent apoptosis inducer GRIM-19. The human OLFM4 is also thought to be a useful marker for early myeloid development.
Function : May promote proliferation of pancreatic cancer cells by favoring the transition from the S to G2/M phase. In myeloid leukemic cell lines, inhibits cell growth and induces cell differentiation and apoptosis. May play a role in the inhibition of EIF4EBP1 phosphorylation/deactivation. Facilitates cell adhesion, most probably through interaction with cell surface lectins and cadherin.
Subunit : Homomultimer; disulfide-linked. Interacts with NDUFA13. Interacts with cell surface lectins (locutions ricinus communis agglutinin I, concanavalin-A and wheat germ agglutinin) and cadherin.
Subcellular Location : Secreted, extracellular space. Mitochondrion. Note=Subcellular location is not clearly defined: has been shown to be secreted (PubMed:16566923), but also in the mitochondrion (PubMed:15059901 and PubMed:20724538), cytoplasm and plasma membrane (PubMed:20724538) and in the nucleus (PubMed:15059901).
Tissue Specificity : Expressed during myeloid lineage development. Much higher expression in bone marrow neutrophils than in peripheral blood neutrophils (at protein level). Strongly expressed in the prostate, small intestine and colon and moderately expressed in the bone marrow and stomach. Overexpressed in some pancreatic cancer tissues.
Post-translational modifications : N-glycosylated.
Similarity : Contains 1 olfactomedin-like domain.
Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q6UX06.1
英文名称 Anti-ODZ1/Tenascin M
中文名称 固生蛋白M抗体
别 名 Odz (odd Oz/ten m Drosophila) homolog 1; Odz (odd Oz/ten m Drosophila) homolog 3; ODZ 1; ODZ 3 ; Odz odd Oz/ten m homolog 1; ODZ3; Protein Odd Oz/ten m homolog 1; Ten 1; TEN M1; Ten1;y Tenascin M; TenascinM; Tenascin-M; Teneurin 1; Teneurin1; TNM 1; TNM; TNM1; TEN1_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗
研究领域
兔胸腺细胞白抗原G检测试剂盒亚麻酸甲酯 99%水质镍标样 浓度范围:0.959-1.01(mg/L),分析标准品
白衍生趋化因子2检测试剂盒2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮 95%纳米镍粉 比表面积10m2/g-60m2/g, 粒度20nm-100nm,99.9%
白血病抑制因子检测试剂盒油酸甲酯 分析标准品,>99.0%(GC)电解镍粉 99.5%,200目
半胱氨酸蛋白酶1检测试剂盒油酸甲酯 99%还原镍粉 99.5%,5μm
半胱氨酸蛋白酶3检测试剂盒油酸甲酯 Standard for GC,≥99%(GC)雾化镍粉 99.8%,200目
半胱氨酸蛋白酶8检测试剂盒酸甲酯 98%锑酸钠 98%
半胱氨酸蛋白酶9检测试剂盒酸甲酯 95%酸锌 Anhydrous
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报