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产品资料

小鼠骨肉瘤成骨细胞

小鼠骨肉瘤成骨细胞
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  • 产品名称:小鼠骨肉瘤成骨细胞
  • 产品型号:BH-X019666
  • 产品展商:博湖
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简单介绍
收到小鼠骨肉瘤成骨细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
产品描述

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产品名称

规格

货号

小鼠骨肉瘤成骨细胞

1×106

BH-X019666

培养方法

传代方法 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;

生长条件 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。

存储条件 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。 


实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 

2.所使用的盖玻片应该为玻璃**,并经过铬酸洗液处理; 

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Subunit : Isoform 1 and isoform 2 interact with RNF128. Isoform 1 forms a ternary complex with RNF128 and USP8. Isoform 1 interacts with the C-terminal UCH catalytic domain of USP8. Isoform 2 does not associate with USP8. Interacts with FUS, ESR1 and GNB2L1/RACK1. Interacts with UBE2N/UBC13.

Subcellular Location : Cytoplasm.

Tissue Specificity : Isoform 1 is ubiquitous. Isoform 2 is expressed only in lymphoid tissues such as tonsils, lymph nodes and spleen, as well as peripheral blood mononuclear cells.

Similarity : Belongs to the peptidase C65 family. Contains 1 OTU domain.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q96FW1.2

英文名称  Anti-Orexin B

中文名称  增食欲素B/欲B

     HCRT; Hcrt2; Orexin 2; Orexin-2; hypocretin (orexin) neuropeptide precursor; Hypocretin 2; hypocretin; NRCLP1; Orexin; Orexin precursor; OX; PPOX; prepro orexin; OREX_HUMAN; PPORX.

     1mg/1ml

 0.1ml/100μg  0.2ml/200μg

抗体来源  Rabbit  

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

产品类型  一抗    

研究领域  肿瘤 细胞生物 神经生物学  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 3kDa

     Lyophilized or Liquid

 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Orexin B
小鼠骨肉瘤成骨细胞骨骼肌受体酪氨酸激酶抗体检测试剂盒3-氯新戊酰氯 98%L-缬氨酸乙酯盐酸盐 98%

肌球蛋白轻链激酶检测试剂盒氯代正烷 99%N-α-苄氧羰基-L-2,4-二氨基丁酸 99%

肌球蛋白重链检测试剂盒二氯乙酰氯 98%防扩散逆止阀 NN-62726.090

肌肉生长抑制素;肌抑素检测试剂盒三乙酯 97%2-乙酯 98%

肌酸激酶检测试剂盒乙酯 AR,99% 5,6-二并咪唑(5,6-DBI) 99%

肌酸激酶同工酶BB检测试剂盒异丁酰氯 98%甲酸 96%

肌酸激酶同工酶MB检测试剂盒甲酯 AR,99.0%甲酸 99%


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