上海抚生实业有限公司
新增产品
|
公司简介
注册时间:
2021-06-18
联系人:
电话:
Email:
首页
公司简介
产品目录
公司新闻
技术文章
资料下载
成功案例
人才招聘
荣誉证书
联系我们
产品目录
科研抗体
多克隆抗体
对照品
植物对照品
细胞
细胞基础培养基
原代细胞培养
细胞系
菌种
ATCC菌种
A类
进口生化检测试剂盒
科研细胞
科研菌种
试剂盒
进口ELISA试剂盒
生化试剂
其它化学试剂
植物**及核酸类
碳水化合物类
色素类
培养基类
酶类
***类
缓冲剂类
分离材料及耗材类
蛋白质类
ELISA试剂盒
其它ELISA试剂盒
进口ELISA试剂盒
生化检测试剂盒
其他
抗体类产品
细胞培养基产品
酶试剂产品
分子生物学产品
Western Blot系列产品
Apoptosis系列产品
染液类产品
常用生化类试剂盒
抗氧化检测试剂及科研试剂
PCR检测试剂盒
PCR检测试剂盒
恒温扩增法
PCR-荧光探针法
恒温荧光法
荧光PCR法
当前位置:
首页
>>>
公司新闻
>
公司新闻
高香草酸试剂盒操作流程的介绍
高香草酸试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中高香草酸(HVA)水平。用纯化的高香草酸(HVA)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入高香草酸(HVA),再与HRP标记的高香草酸(HVA)抗原结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的高香草酸(HVA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中高香草酸(HVA)浓度。
高香草酸试剂盒操作流程如下:
1.待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
2.酶标板置4℃,包被过夜。
3.洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4.阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5.酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
6.洗板,同4。
7.每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8.酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
9.洗板,同4。
10.每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
11.每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12.分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,终测得的od值为两者之差w1-w2,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13.数据处理:在得出标本s和阴性对照n的od值后,计算s/n值。s/n***2.1为阳性判定标准。
上一篇:
WB抗体试验说明
下一篇:
PCR试剂盒组成构成
若网站内容侵犯到您的权益,请通过网站上的联系方式及时联系我们修改或删除