上海抚生实业有限公司
新增产品
|
公司简介
注册时间:
2021-06-18
联系人:
电话:
Email:
首页
公司简介
产品目录
公司新闻
技术文章
资料下载
成功案例
人才招聘
荣誉证书
联系我们
产品目录
科研抗体
多克隆抗体
对照品
植物对照品
细胞
细胞基础培养基
原代细胞培养
细胞系
菌种
ATCC菌种
A类
进口生化检测试剂盒
科研细胞
科研菌种
试剂盒
进口ELISA试剂盒
生化试剂
其它化学试剂
植物**及核酸类
碳水化合物类
色素类
培养基类
酶类
***类
缓冲剂类
分离材料及耗材类
蛋白质类
ELISA试剂盒
其它ELISA试剂盒
进口ELISA试剂盒
生化检测试剂盒
其他
抗体类产品
细胞培养基产品
酶试剂产品
分子生物学产品
Western Blot系列产品
Apoptosis系列产品
染液类产品
常用生化类试剂盒
抗氧化检测试剂及科研试剂
PCR检测试剂盒
PCR检测试剂盒
恒温扩增法
PCR-荧光探针法
恒温荧光法
荧光PCR法
当前位置:
首页
>>>
公司新闻
>
公司新闻
WB抗体试验说明
WB抗体检测某一个基因的表达产物或者要比较表达产物量的相对变化,先选方法是western blot。而Western Blot试验中比较这些的前提条件是等量的细胞上样,这样才有比较的基础。而人为的操作会产生一定的误差,这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参来校正。因此选择一个合适的内参抗体来校正上样误差是非常重要的。所以严谨的Western Blot实验设计中需要有良好的参照体系,后续的实验结果分析才具有说服性。
在Western Bloting实验中,可能内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins),它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。
在Western Blotting 中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
常用的细胞总蛋白质内参有GAPDH、beta-actin和beta-tubulin等。对于一些植物的样本,则需要特别的植物Actin蛋白作为内参,同样的,如果提取的样本是细胞核蛋白,那么PCNA或者组蛋白H3都是被经常使用的,而针对一些研究线粒体的客户,那么Cox IV则被较多的文献引用作为线粒体总蛋白的内部参考。
上一篇:
elISA试剂盒说明书标本要求介绍
下一篇:
高香草酸试剂盒操作流程的介绍
若网站内容侵犯到您的权益,请通过网站上的联系方式及时联系我们修改或删除