公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。
产品名称
|
兔睾丸间质细胞
|
规格
|
详见说明书
|
货号
|
FS-016477
|
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为玻璃**,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
细胞处理方法:
产品名称以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理,如需要更详细技术指导,请及时电话或邮件联系。
一.贴壁细胞
客户接收到细胞,用75%的酒精(建议配制75%酒精的水是过的)培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。
显微镜观察细胞,当细胞融汇至80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2 培养。
二.悬浮细胞
1. 接收到细胞,用75%的酒精(建议配制75%酒精的水是过的)培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。
3. 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。
5. 1000rpm,5min离心,重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2 培养。
4-MUG(4-甲基伞形酮-β-D-葡糖苷酸) 人6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISA Kit
小鼠抗HA标签单抗(1000 μL) Nautilia medium
pTGV-Express-CAT SMR5916(pTGVExpressCATSMR5916) pEGFP-Tub(pEGFPTub)(60908-2642)
Phosphate Citrate Buffer,2X 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA Kit
人β球蛋白(β-Lg)ELISA Kit 酸葡聚糖
Na sphingobacterium medium pQCXIP
pET28a-HA-CPDSalI(pET28aHACPDSalI) Vitale辣根过氧化物酶法过氧化物酶显色试剂盒
小鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA Kit 大鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA Kit
SuperTOPO-Amp通用克隆试剂盒(SuperTOPO三剑客) Methylocapsa aurea
pRS315 pCMV-GLuc 2(pCMVGLuc2)
BSA Blocking Buffer in PBS 兔溶酶(LZM)ELISA Kit
人E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit 生物磁珠2:醛基磁珠(停产)
Pelobacter (fuf) medium pmOrange2-C1(pmOrange2C1)
鱼腥草素钠 英文名称:Sodium Houttuyfonate 规格::50mg 保存::-20℃,避光
羧甲司坦 英文名称:Carbocisteine 规格::100mg 保存::-20℃,避光
色甘酸钠 英文名称:Cromolyn sodium 规格::1000mg 保存::-20℃,避光
双嘧达莫 英文名称:Dipyridamole 规格::50mg 保存::-20℃,避光
兔睾丸间质细胞石杉碱甲 英文名称:Huperzine A 规格::50mg 保存::-20℃,避光
十一酸睾酮 英文名称:Eleven acid testosterone 规格::50mg 保存::-20℃,避光
羟甲豆素 英文名称:Hymecromone 规格::100mg 保存::-20℃,避光
士的 英文名称:Strychnine hydrochloride 规格::100mg 保存::-20℃,避光
尼尔雌 英文名称:Neal female alcohol 规格::100mg 保存::-20℃,避光
米诺地尔 英文名称:Minoxidil 规格::100mg 保存::-20℃,避光
苯丙哌啉 英文名称:Benproperine phosphate 规格::100mg 保存::-20℃,避光
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报