操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。
产品名称
|
规格
|
货号
|
兔髓核细胞
|
详见说明书
|
FS-016524
|
细胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、酵母。
![](//yt.yzimgs.com/ComFolder/200132342/image/202109/202109071414317091.jpg)
培养步骤:
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
![](//yt.yzimgs.com/ComFolder/200132342/image/202109/202109071414312911.jpg)
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠尿激酶(UK)ELISA Kit
Galenea mj medium (co2)
pAG413GPD-ccdB-TAP(pAG413GPDccdBTAP)
溶血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联分析体 (sEPCR)ELISA Kit
大提无内质粒DNAout
pMETα C(pMETαC)(60908-4989)
Zirkle-Erliki固定液
大鼠III型前胶原肽(P III NT)ELISA Kit
Desulfotomaculum acetoxidans medium
pBad/Myc-His A (pBadMycHisA)(60908-670)
人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA Kit
过氧化氢定量分析试剂盒(脂兼容)
pLenti6 V5-DEST(pLenti6V5DEST)
兔髓核细胞黄杞苷 英文名称:Huang Qigan 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
京尼平 英文名称:Genipin 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
女贞苷 英文名称:Ligustrum Lucidum Ait 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
特女贞苷 英文名称:Characteristics of Ligustrum Lucidum Ait 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
氯化矢车菊素;花青素 英文名称:Cyanidin chloride; anthocyanin 规格::HPLC≥98% 5mg/支 保存::-20℃,避光
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷;花青素 英文名称:Cyanidin -3-O- glucoside; anthocyanin 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
东莨菪内酯;莨菪亭,莨菪亭,东莨菪素 英文名称:Scopoletin; scopoletin scopoletin scopoletin,, 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
丁东莨菪碱;丁溴东莨菪碱; 溴丁东莨 英文名称:Scopolamine Butylbromide scopolamine Butylbromide; bromine; Ding Donglang 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
东莨菪碱;东莨菪碱盐 英文名称:Scopolamine hydrobromide; hyoscine hydrobromide 规格::HPLC≥98%20mg/支 保存::-20℃,避光
东莨菪苷 英文名称:Scopolin 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
氯化两面针碱 英文名称:Nitidine chloride 规格::HPLC≥98% 20mg/支 保存::-20℃,避光
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报