细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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769-P人肾细胞腺癌细胞
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英文名称
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769-P:769P
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产品货号
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A01X634
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样
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产品种属
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人
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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组织来源
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器官:肾;:肾透明细胞腺癌
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 769-P细胞来源于原发性透明细胞腺癌;769-P细胞呈边界不清楚的球形、高核质比、有微绒毛和桥粒;769-P细胞可以在软琼脂中生长。
年龄(性别) 女;63岁
组织来源 器官:肾;:肾透明细胞腺癌
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肾癌细胞
生物等级 1
倍增时间 ~35 hours
致瘤性 Yes, forms colonies in soft agar.Yes, forms tumors in immunosuppressed hamsters.Yes, forms tumors in nude mice.
保藏机构 ATCC; CRL-1933
公司正在出售的产品:
核仁结构域蛋白NOM1抗体 NOM1
通用转录因子2H亚基3/TTFIIH p34抗体 GTF2H3
四分子交联体14抗体(四旋蛋白) Anti-TSPAN14 磷酸化血小板源性生长因子受体-B抗体 Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)
磷酸化泌乳素抗体 Anti-phospho-PRL (Ser163) 突触结合蛋白12抗体 Anti-Synaptotagmin XII
磷酸化着丝粒蛋白A Phospho-CENPA (Ser7)
嗅觉受体5AU12抗体 OR5B12
原癌基因WIP1抗体 Anti-WIP1/PPM1D 磷酸化细胞核分离基因C蛋白抗体 Anti-phospho-NUDC(Ser326)
环指蛋白123抗体 Anti-RNF123 睾丸凋亡基因抗体 Anti-SRG11/Spata17
大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa分析检测试剂盒 Rat β-Defensins ELISA Kit
人核心结合因子α1,CBFA1/RUNX2 elisa分析检测试剂盒 HumanCoreBindingFactoralpha1CBFA1/RUNX2ELISAKit
木质素含量测试盒 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa分析检测试剂盒
组织甘油二脂酰激酶(DAG KINASE)酶连续循环比色法定量检测试剂盒 人干扰素活化基因205(Ifi205)elisa分析检测试剂盒
LCK相互作用膜蛋白抗体 LIME
769-P人肾细胞腺癌细胞绒毛膜绒毛体催乳素样蛋白1抗体 CSHL1
白细胞介素27β抗体 IL-27beta
果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗体 alpha-L-arabinofuranosidase
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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