细胞培养操作： 1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
产品名称 A375+EGFP人恶性黑色素瘤细胞+EGFP 英文名称 A375+EGFP:A375EGFP 产品货号 A01X644 培养条件 生长特性 贴壁生长 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 人 冻存条件 详见说明 组织来源 人黑色素瘤 用途 仅供科研研究实验 商品详情：
产品名称
A375+EGFP人恶性黑色素瘤细胞+EGFP
英文名称
A375+EGFP:A375EGFP
产品货号
A01X644
培养条件
生长特性
贴壁生长
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
详见说明
组织来源
人黑色素瘤
用途
仅供科研研究实验
细胞介绍
A375源自一位54岁女性，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在抑制小鼠上成瘤，在琼脂上形成克隆。
A375-EGFP是在 A375细胞上用慢病毒标记上EGFP，可以显示绿色荧光，带有嘌呤霉素抗性。
细胞特性
1） 来源：人黑色素瘤
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x10⁶ 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
血清类粘蛋白1样蛋白1+2+3抗体 ORMDL1 + ORMDL2 + ORMDL3
钙结合蛋白39抗体 CAB39
Toll样受体2抗体 Anti-TLR2/CD282 血小板源性生长因子A抗体 Anti-PDGF-A
磷酸化丙酮酸脱氢酶α1抗体 Anti-phospho-PDHA1(Ser293) SUGT1蛋白抗体 Anti-SUGT1
环氧化物水解酶1抗体 Epoxide hydrolase 1
动力蛋白轻链 DYNLT1
锌指蛋白ZBTB6抗体 Anti-ZBTB6/ZNF482 钠钾离子转运蛋白1抗体 Anti-NKCC1
环指蛋白130抗体 Anti-RNF130 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体 Anti-STSL/ABCG8
大鼠P21蛋白(P21)elisa分析检测试剂盒 P21 ELISA Kit
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)elisa分析检测试剂盒 MPIF-1ELISAKit
细胞半胱-10（CASPASE-10）活性荧光定量检测试剂盒 人P物质（SP）elisa检测试剂盒
大鼠β2整合素(ITG β2/CD11+CD18)elisa分析检测试剂盒 小鼠肾上腺素能受体β1(ADRβ1)elisa检测试剂盒
LSM5蛋白抗体 LSM5
A375+EGFP人恶性黑色素瘤细胞+EGFP转录因子BTF3抗体 BTF3
17β羟类固醇脱氢酶14/17β-HSD14抗体 HSD17B14
Fyn结合蛋白抗体 ADAP/FYB
细胞传代培养操作步骤： （1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。 （2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。 （3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 （4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。 （5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。 （6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。 （7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。 （8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 （9）细胞冻存。