细胞培养操作： 1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
产品名称 AML-12小鼠肝实质细胞 英文名称 AML-12:AML12 产品货号 A01X1028 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%, 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 小鼠 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 肝脏 用途 仅供科研研究实验 商品详情：
产品名称
AML-12小鼠肝实质细胞
英文名称
AML-12:AML12
产品货号
A01X1028
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%,
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
小鼠
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
肝脏
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
温度：液氮
培养方案A（默认）
生长培养基:
DMEM/F12＋10% FBS＋0.5% ITS-G（100×）＋40ng/ml Dexamethasone＋1% P/S
培养条件:
气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:4-1:6
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 The AML12 (alpha mouse liver 12) cell line was established from hepatocytes from a mouse (CD1 strain, line MT42) transgenic for human TGF alpha.
年龄（性别） 雄性；3月龄
组织来源 肝脏
细胞类型 自发永生化细胞
生物等级 BSL-1
倍增时间 ~37 hours
致瘤性 NO
基因表达情况 albumin; human transforming growth factor alpha (TGF alpha); mouse TGF alpha.
保藏机构 ATCC; CRL-2254 BCRC; 60326 BCRJ; 0354
支架蛋白IQGAP2抗体 IQGAP2
自噬相关蛋白10抗体 Apg10
细胞N-链接硫酸酯化糖胺多糖（N-sGAG）含量二甲基亚甲基蓝（DMMB）比色法定量检测试剂盒 小鼠白介素4(IL-4)elisa检测试剂盒
单胺氧化酶测试盒 CYP1A2蛋白共沉淀分析试剂盒
RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗体 RAB40A
表皮生长因子样蛋白2抗体 CELSR2
葡萄糖神经酰胺合成酶抗体 Anti-UGCG/Ceramide glucosyltransferase 泛酸激酶2抗体 Anti-PANK2
Ⅱ型胶原α1 N端前体肽抗体 Anti-procollagen type IIA 精神障碍相关GAP蛋白抗体 Anti-srGAP3
APC标记的羊抗兔IgG H&L Goat Anti-Rabbit IgG H&L / APC
锌指蛋白399抗体 ZDHHC11/ZNF399
牛心肌肌钙蛋白T(cTn-T)elisa分析检测试剂盒 cTn-T ELISA kit
小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa分析检测试剂盒 HMGB-1ELISAKit
仓鼠白介素3(IL-3)elisa分析检测试剂盒 IL-3 ELISA Kit
AML-12小鼠肝实质细胞人电子转运黄素蛋白-泛醌氧化还原酶/电子转运黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)elisa分析检测试剂盒 HumanETFDHELISAkit
癌/睾丸抗原抗体86抗体 OIP-5/CT86
9号染色体开放阅读框89抗体 C9orf89
细胞传代培养操作步骤： （1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。 （2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。 （3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 （4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。 （5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。 （6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。 （7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。 （8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 （9）细胞冻存。