细胞培养操作： 1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
产品名称 B16-F10小鼠黑色素瘤细胞 英文名称 B16-F10:B16F10 产品货号 A01X1032 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%, 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 梭形细胞样；上皮样细胞样 产品种属 小鼠 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 器官：皮肤；品系：C57BL/6J；：黑色素瘤 用途 仅供科研研究实验 商品详情：
产品名称
B16-F10小鼠黑色素瘤细胞
英文名称
B16-F10:B16F10
产品货号
A01X1032
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%,
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
梭形细胞样；上皮样细胞样
产品种属
小鼠
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
器官：皮肤；品系：C57BL/6J；：黑色素瘤
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 梭形细胞样；上皮样细胞样
温度：液氮
培养方案A（默认）
生长培养基:
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培养条件:
气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
注意事项 B16系列细胞，使用DMEM培养时可能出现黑色素快速积累，细胞不增殖或死亡的情况，该细胞正常扩增冻存请使用RPMI-1640完培，若您需要进行分泌黑色素等后续相关实验，可以在扩增冻存细胞后更换为DMEM培养来满足实验设计。
参考资料(来源文献)
背景描述 B16-F10细胞是B16-F0细胞的亚系。
年龄（性别） 不详
组织来源 器官：皮肤；品系：C57BL/6J；：黑色素瘤
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 黑色素瘤细胞
生物等级 BSL-1
保藏机构 ATCC; CRL-6475
磷酸化Ephrin B2抗体 phospho-Ephrin B2 (Tyr311/316) 热休克因子蛋白5抗体 HSF5 血小板反应蛋白抗体 Anti-TSP-1/THBS1/Thrombospondin 1 G蛋白偶联嘌呤受体p2y12抗体 Anti-P2Y12 蛋白酶调解因子8抗体 Anti-PSMD8 SMAD家族9抗体 Anti-SMAD9 罗丹明标记的兔抗人IgA Rabbit Anti-Human IgA / RBITC 磷酸化接头蛋白Gab 2抗体 phospho-GAB2 (Tyr452) 锌指蛋白474抗体 Anti-ZNF474/ZFP106 神经元素2抗体 Anti-Neurogenin 2/NGN2 磷酸化原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体 Anti-phospho-Ron/MST1R(Ser1349) 肿瘤抑制蛋白18抗体 Anti-ST18/Znf387 大鼠17-酮类固醇(17-KS)elisa分析检测试剂盒 17-KS ELISA Kit 人复制蛋白A(RPA-70)elisa分析检测试剂盒 HumanRPA-70ELISAKit 人肺炎支原体抗体(MP-Ab)elisa分析检测试剂盒 细胞结合（酯化）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 小鼠腺苷酸环化酶10(ADCY10)elisa检测试剂盒 大鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)elisa检测试剂盒免费代测 恶性纤维组织细胞瘤抗体 MFHA1/Malignant fibrous histiocytoma B16-F10小鼠黑色素瘤细胞脱氢肽酶1抗体 DPEP1 BCL2样10促凋亡蛋白抗体 BCL2L10 CD20抗体 CD20 酪氨酸磷酸酶受体相互作用蛋白Liprin α2抗体 Liprin alpha 2 磷酸二酯酶8B抗体 PDE8B
磷酸化Ephrin B2抗体 phospho-Ephrin B2 (Tyr311/316)
热休克因子蛋白5抗体 HSF5
血小板反应蛋白抗体 Anti-TSP-1/THBS1/Thrombospondin 1 G蛋白偶联嘌呤受体p2y12抗体 Anti-P2Y12
蛋白酶调解因子8抗体 Anti-PSMD8 SMAD家族9抗体 Anti-SMAD9
罗丹明标记的兔抗人IgA Rabbit Anti-Human IgA / RBITC
磷酸化接头蛋白Gab 2抗体 phospho-GAB2 (Tyr452)
锌指蛋白474抗体 Anti-ZNF474/ZFP106 神经元素2抗体 Anti-Neurogenin 2/NGN2
磷酸化原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体 Anti-phospho-Ron/MST1R(Ser1349) 肿瘤抑制蛋白18抗体 Anti-ST18/Znf387
大鼠17-酮类固醇(17-KS)elisa分析检测试剂盒 17-KS ELISA Kit
人复制蛋白A(RPA-70)elisa分析检测试剂盒 HumanRPA-70ELISAKit
人肺炎支原体抗体(MP-Ab)elisa分析检测试剂盒 细胞结合（酯化）酶连续循环比色法定量检测试剂盒
小鼠腺苷酸环化酶10(ADCY10)elisa检测试剂盒 大鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)elisa检测试剂盒免费代测
恶性纤维组织细胞瘤抗体 MFHA1/Malignant fibrous histiocytoma
B16-F10小鼠黑色素瘤细胞脱氢肽酶1抗体 DPEP1
BCL2样10促凋亡蛋白抗体 BCL2L10 CD20抗体 CD20
酪氨酸磷酸酶受体相互作用蛋白Liprin α2抗体 Liprin alpha 2 磷酸二酯酶8B抗体 PDE8B
细胞传代培养操作步骤： （1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。 （2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。 （3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 （4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。 （5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。 （6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。 （7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。 （8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 （9）细胞冻存。