细胞培养操作： 1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性：
产品名称 BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纤维细胞 英文名称 BALB/3T3 clone A31:BALB3T3 clone A31 产品货号 A01X1035 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 成纤维细胞样 产品种属 小鼠 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 胚胎；成纤维细胞 用途 仅供科研研究实验 商品详情：
产品名称
BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纤维细胞
英文名称
BALB/3T3 clone A31:BALB3T3 clone A31
产品货号
A01X1035
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
成纤维细胞样
产品种属
小鼠
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
胚胎；成纤维细胞
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 成纤维细胞样
生长培养基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S
温度：液氮
温度：37℃
推荐传代比例 1:2-1:3
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 BALB/3T3 clone A31细胞是由S·A·Aaronson和G·T·Todaro于1968年从裂解的14-17天的BALB/c小鼠胚胎中建立的几株细胞之一。BALB/3T3 clone A31细胞对接触抑制特别敏感，生长需高倍数稀释，饱和浓度低。此外，BALB/3T3 clone A31细胞对癌基因DNA病毒SV40和小鼠肉瘤病毒高度易感。
年龄（性别） 胚胎，怀孕14-17天
组织来源 胚胎；成纤维细胞
细胞类型 自发永生化细胞
生物等级 1
保藏机构 ATCC; CCL-163 ECACC; 86110401
环一螺旋蛋白1抗体 NHLH1
糖代谢相关蛋白1抗体 GMRP1
肿瘤易感基因101蛋白抗体 Anti-Tsg101 纤维蛋白溶酶原抗体 Anti-Plasminogen
紧密连接蛋白抗体 Anti-OCLN/Occludin 磷酸化5-脂氧合酶抗体 Anti-Phospho-5-Lipoxygenase(Ser663)
磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗体 phospho-IKKi (Thr501)
嗅觉受体51V1抗体 OR51V1
信号通路WNT8A抗体 Anti-Wnt8A 脑特异性蛋白BPX抗体 Anti-NAP1L2
受体活性修饰蛋白3抗体 Anti-RAMP3 Tafazzin蛋白抗体 Anti-Tafazzin
大鼠白介素1受体样1(IL1RL1)elisa分析检测试剂盒 IL1RL1 ELISA Kit
人肌红蛋白(MYO/MB)elisa分析检测试剂盒 HumanMyoglobinELISAKit
小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)elisa分析检测试剂盒 麦芽汁β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒
猪儿茶酚胺(CA)elisa检测试剂盒 大鼠血管紧张素1-7（ANG 1-7）elisa检测试剂盒
层粘连蛋白β4抗体 Laminin subunit beta-4/LAMB4
BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纤维细胞外壳蛋白COPE抗体 COPE
人单纯疱疹病毒Ⅰ型神经毒性因子ICP34.5抗体 Neurovirulence factor ICP34.5
中心激酶MAP4K2抗体 Germinal Center Kinase
细胞传代培养操作步骤： （1）当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时，进行传代。 （2）吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次，摇匀后弃掉。 （3）加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 （4）培养瓶放入37℃培养箱进行消化，3min左右拿出，用显微镜观察细胞有无超过80%的量，发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均匀，避免消化过度。 （5）细胞悬液吸至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。 （6）吸弃上清，加入培养液重悬细胞，吹打细胞使其均匀分散。 （7）吸弃细胞悬液，选择适合的密度接种到新培养瓶中，补充培养液并摇匀，放置37℃的CO2培养箱进行培养。 （8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 （9）细胞冻存。