细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称 CW-2人结肠癌细胞 英文名称 CW-2:CW2 产品货号 A01X695 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%, 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 人 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 结肠 用途 仅供科研研究实验 商品详情:
产品名称
CW-2人结肠癌细胞
英文名称
CW-2:CW2
产品货号
A01X695
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%,
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
结肠
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
DMEM+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 CW-2细胞来源于结肠癌,CEA阳性;CW-2细胞移植于裸鼠可成瘤。
组织来源 结肠
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肠癌细胞
血红蛋白γ2抗体 Hemoglobin subunit gamma 2
转移生长因子α抗体(TGFα) Anti-TGF alpha 粘着斑激酶抗体 Anti-FAK/PTK2
OTUD7A蛋白抗体 OTUD7A
激肽原1重链抗体 Lysyl-bradykinin
锌指蛋白195抗体 Anti-ZNF195 神经调节肽S抗体 Anti-NMS/Neuromedin S
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体 Anti-phospho-AMPK beta 1 (Ser182) 转录调节因子DEC2抗体 Anti-SHARP1/DEC2
嗅觉受体ai1抗体 Orai1
RNA结合蛋白38抗体 Anti-RBM38 脑磺基转移酶样蛋白4A1抗体 Anti-SULT4A1人谷胱甘肽S转移酶TT(GSTπ)elisa分析检测试剂盒 GSTπELISAKit
糖蛋白β-1B抗体 Hemopexin
大鼠Kelch样ECH相关蛋白1(KEAP1)elisa分析检测试剂盒 KEAP1 ELISA kit
水样品内浊度法定量检测试剂盒 人球蛋白E(IgE)elisa检测试剂盒
大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa分析检测试剂盒 猪骨成型蛋白7(BMP7)elisa分析检测试剂盒
肿瘤坏死因子C/β抗体 Lymphotoxin Beta
CW-2人结肠癌细胞细胞色素P450 2C11抗体 Cytochrome P450 2C11
转录因子OTX2抗体 OTX2
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。