细胞系实验步骤:
一、细胞培养准备:
生物柜的使用:确保所有接触细胞的物品都在生物柜中通过紫外,防止污染。
培养皿和培养瓶:提供细胞生长的环境,保持恒定的温度(通常为37℃)。
培养基和血清:特制的培养基包含各种营养物质,如糖、氨基酸和维生素,添加胎牛血清和双抗以提供生长因子和防止污染。
二、细胞培养过程:
细胞接收与记录:记录细胞系的相关信息,包括背景信息、传代培养、冷冻保存等。
细胞形态观察:定期检查细胞的形态和行为,确保细胞状态健康,无污染。
细胞传代:当细胞密度超过80%时进行传代,注意消化时间和条件,避免细胞损伤。
三、细胞系鉴定与维护:
细胞系鉴定:通过STR图谱确定细胞的遗传特征,防止细胞系被误认或交叉污染。
细胞保存与管理:定期进行细胞冷冻保存,确保细胞的长期存活和可用性。
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D283 Med人脑髓母细胞瘤细胞
商品属性:
产品货号
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A01X697
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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产品分类
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人细胞系
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产品种属
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人
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生长特性
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半贴半悬
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细胞形态
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上皮细胞样
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英文名称
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D283 Med:D283 Med
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组织来源
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脑组织
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商品介绍:
生长特性 半贴半悬
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO₂,5%
温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 D283 Med细胞是由Frien等人于1985年建系,源自一名6岁患有神经管细胞瘤有腹腔转移的白人男性小孩的腹水细胞。
年龄(性别) 男;6岁
组织来源 脑组织
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 成髓瘤细胞
生物等级 1
倍增时间 ~52 hours
致瘤性 Yes, in nude mice(The cells form serially transplantable intercranial and subcutaneous tumors.)Yes, in soft agar
基因表达情况 The cells produce tumors in nude mice and the resulting tumors are glutamine synthetase positive; neuron specific enolase positive; glial fibrillary acidic proteins negative; S100 (S-100) protein negative; The cells express elevated levels of four biochemical markers of SCLC (neuron specific enolase; the brain isoenzyme of creatine kinase; L-DOPA decarboxylase; bombesin-like immunoreactivity)
保藏机构 ATCC; HTB-185IZSLER; BS TCL 203KCB; KCB 2010201YJ
公司正在出售的产品:
线粒体乙酰化酶3抗体 [KO验证抗体] SIRT3 心肌营养素1抗体 CT-1
磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体 Phospho-PKC gamma (Thr514) 磷酸化紧密连接蛋白6抗体 phospho-Claudin 6 (Tyr219)
胞质动力蛋白轻链中间体1抗体 DNCLI1 补体因子H重组兔单克隆抗体 CFH
核仁蛋白9抗体 NOL9 核转录因子YB抗体 NFYB
少突胶质细胞转录因子1抗体 OLIG1 神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN3抗体 CLN3
CD44v7抗体 CD44v7 CXXC型锌指蛋白4抗体 CXXC4
轴突生长诱向因子G1/神经突起生长导向因子G1抗体 Netrin-G1 转录因子HES-1抗体 HES1
MTO1蛋白抗体 MTO1 O-唾液酸糖蛋白内肽酶抗体 OSGEP苹果酸含量测试盒 酵母甘肽过氧化物酶(GSH PX)活性比色法定量检测试剂盒
细胞角蛋白15重组兔单克隆抗体 Cytokeratin 15
大鼠白介素2可溶性受体β链(sIL-2Rβ)elisa检测试剂盒 小鼠降钙素(CT)elisa分析检测试剂盒
脂肪酶(LPS)测试盒 大鼠糖原磷酸化酶工酶II(GP-II)elisa检测试剂盒
植物叶绿体总蛋白定量检测试剂盒 线粒体呼吸链复合物 Ⅴ 活性测试盒 20管/10样 生化法
人补体C1q(C1q)elisa检测试剂盒 血液磷酸二酯酶(PDE)总活性荧光定量检测试剂盒
D283 Med人脑髓母细胞瘤细胞小鼠糖皮质受体β(GR-β)elisa分析检测试剂盒 大鼠碱性磷酸酶(ALP)elisa检测试剂盒
LYRM2蛋白抗体 LYRM2
培养注意事项 :
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
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