细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称
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DMS 53人肺癌细胞
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英文名称
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DMS 53:DMS 53
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产品货号
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A01X704
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%,
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样
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产品种属
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人
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冻存条件
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冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
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组织来源
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肺
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用途
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仅供科研研究实验
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商品详情:
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
Waymouth's MB 752/1+10%FBS+1%P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:3
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 DMS 53 is a cell line exhibiting epithelial morphology that was isolated in 1974 from the lung of a 54-year-old, White male patient with carcinoma.
年龄(性别) 男性;54岁
组织来源 肺
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生物等级 BSL-1
倍增时间 5.7 days (PubMed=6266631); 4.9 days (PubMed=2986244)
致瘤性 Yes; Yes, tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 10^7 cells.
受体表达情况 Bombesin, expressed; epidermal growth factor (EGF), expressed; transforming growth factor beta (TGF beta), expressed; acetylcholine, expressed
抗原表达情况 Leu 7; My23
基因表达情况 adrenocorticotropin (adrenocorticotropic hormone, ACTH); bombesin; calcitonin; human chorionic gonadotropin (hCG); glucagon; growth hormone; 17 beta estradiol; thyroid releasing hormone; oxytocin - neurophysin (OT-NP); parathormone; somatostatin-like immunoreactivity (SRIF)
保藏机构 AddexBio; C0016027/4988 ATCC; CRL-2062 ECACC; 95062823
公司正在出售的产品:
生长停滞特异性蛋白8抗体 GAS8
血小板**素受体抗体 Anti-TPOR/CD110/C-MPL 磷酸化p21激活激酶1/2/3抗体 Anti-phospho-PAK1/2/3(Thr423)
NDUFS5蛋白抗体 NDUFS5
上皮细胞有丝分裂蛋白抗体 Epi
T细胞负调节蛋白抗体 Anti-VSIG4 类固醇受体激活蛋白2抗体 Anti-NCOA2/KAT13C/GRIP1
跨膜蛋白Orai2抗体 Anti-Orai2 肌动蛋白依赖染色质调控因子SMARCD3蛋白抗体 Anti-SMARCD3
亲核素β1抗体 NTF97
神经元突触膜胞外分泌调节蛋白4抗体 Anti-RIMS4 T细胞转录调节因子TFEB抗体 Anti-TFEB人基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa分析检测试剂盒 HumanTIMP-4ELISAKit
脑型脂肪酸结合蛋白抗体 FABP7 尿素转运型糖蛋白抗体 SLC14A1
大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)elisa分析检测试剂盒 Cys-C ELISA Kit
人A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)elisa检测试剂盒 C. guilliermondii RFLP基因分析试剂盒
小鼠成纤维细胞生长因子18(FGF18)elisa检测试剂盒 大鼠CDCP1 elisa分析检测试剂盒
赖氨酸N甲基转移酶1B抗体 KMT1B
DMS 53人肺癌细胞细胞骨架相关蛋白2/肿瘤和微管相关蛋白抗体 CKAP2
G蛋白γ 1/Gγ 1 抗体 GNGT1 G蛋白偶联受体GPR85蛋白抗体 GPR85
细胞传代培养操作步骤:
(1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。
(2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。
(3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。
(5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。
(7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。
(9)细胞冻存。
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