细胞培养操作: 1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。24-48h后换液。 2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 c、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
商品属性:
产品名称 EA.hy926人脐静脉细胞融合细胞 英文名称 EA.hy926:EAhy926 产品货号 A01X707 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 产品种属 人 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 组织来源 脐静脉/体细胞杂交 用途 仅供科研研究实验 商品详情:
产品名称
EA.hy926人脐静脉细胞融合细胞
英文名称
EA.hy926:EAhy926
产品货号
A01X707
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
生长特性
贴壁细胞
细胞形态
上皮细胞样
产品种属
人
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
组织来源
脐静脉/体细胞杂交
用途
仅供科研研究实验
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 DMEM+10% FBS+1% P/S
温度:液氮
温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 EA.hy926细胞是在PEG胁迫下,将原代培养的人脐静脉细胞与抗硫niao嘌呤的A549克隆株融合,构建的一株人脐静脉细胞株。融合子在HAT培养基上生长,并以Ⅷ因子相关抗原筛选,EA.hy926细胞已经过100次以上的群体倍增(PDLs)。电镜照片显示,Weibel-Palade小体的细胞质分布以及组织特异性的细胞器,分化的内皮细胞特性如血管**,体内平衡-血栓形成,血压及炎症反应。
组织来源 脐静脉/体细胞杂交
细胞类型 杂交瘤细胞
生物等级 1
倍增时间 ~12-24 hours
抗原表达情况 Factor VIII-related antigen; Homo sapiens, expressed
基因表达情况 Factor VIII-related antigen; Homo sapiens.
保藏机构 ATCC; CRL-2922
卷曲螺旋结构域蛋白47抗体 CCDC47
大鼠磷酸酶张力蛋白源物(PTEN)elisa检测试剂盒 全血线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒
组蛋白乙酰转移酶MORF抗体 KAT6B
核糖核酸酶6抗体 Ribonuclease 6
14-3-3τ蛋白抗体 Anti-14-3-3 Tau 原钙粘附蛋白17抗体 Anti-PCDH17
雌三醇(E3)含量ELISA测试盒 通用型鸡败血支原体(Mycoplasma;MG)基因检测试剂盒
驱动蛋白家族成员15抗体 KIF15
蛋白质磷酸酶2调节亚基1B抗体 Anti-PPP2R1B 泛素特异性蛋白酶9X抗体 Anti-USP9XGAGE1蛋白抗体 GAGE1
细胞色素B5结构域蛋白1抗体 CYB5D1
Cy7标记的羊抗豚鼠IgG H&L Goat Anti-Guinea Pig IgG H&L / Cy7
绵羊黄体**素(LH)elisa分析检测试剂盒 LH ELISA Kit
小鼠端粒酶(TE)elisa分析检测试剂盒 TEELISAKit
骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析检测试剂盒 OT/BGP ELISA Kit
EA.hy926人脐静脉细胞融合细胞人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)elisa分析检测试剂盒 PKC-bIIELISAKit
Lon蛋白酶2抗体 LONP2
细胞传代培养操作步骤: (1)当显微镜下细胞形态和生长密度达到90%时,进行传代。 (2)吸弃培养液。添加PBS清洗1~2次,摇匀后弃掉。 (3)加入覆盖瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。 (4)培养瓶放入37℃培养箱进行消化,3min左右拿出,用显微镜观察细胞有无超过80%的量,发生收缩变圆、细胞间隙变大。轻轻拍打培养瓶使剩余细胞 脱落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均匀,避免消化过度。 (5)细胞悬液吸至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。 (6)吸弃上清,加入培养液重悬细胞,吹打细胞使其均匀分散。 (7)吸弃细胞悬液,选择适合的密度接种到新培养瓶中,补充培养液并摇匀,放置37℃的CO2培养箱进行培养。 (8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间。 (9)细胞冻存。